叶仲力，张建平，蔡国华，吴清辉，邓其馨，方钲中，张廷贵
（福建中烟工业有限责任公司技术中心，福建 厦门 ３６１０２２）
摘要：建立了卷烟滤嘴接装纸、成型纸中荧光增白剂ＡＢＰ、ＶＢＬ检测的ＵＰＬＣ方法。样品采用Ｎ， Ｎ－二甲基甲酰胺超声提取３０ ｍｉｎ，采用ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ （５０ ｍｍ×２．１ ｍｍ，１．７ μｍ）色谱柱分离，用乙腈／水（Ｖ／Ｖ＝２０∶８０，流速０．３ ｍＬ／ｍｉｎ）混合液洗脱，荧光检测器检测。该法前处理简单，回收率高，精密度好，适用于卷烟滤嘴成型纸和接装纸荧光增白剂的测定。
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关键词 ：卷烟；包装材料；荧光增白剂；超高效液相色谱（ＵＰＬＣ）
中图分类号：ＴＳ４１＋１ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）02－0437-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.02.046
食品安全是关系到国计民生的重大问题。近几年，由食品接触性材料相继引发的食品安全问题被广泛关注。荧光增白剂（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ｗｈｉｔｅｎｉｎｇ Ａｇｅｎｔ，ＦＷＡ）是一种能吸收紫外光（波长３００～４００ ｎｍ），并激发蓝色或蓝紫色荧光（波长４２０～４８０ ｎｍ）的复杂有机化合物［１］，能使肉眼感受白光以达到增白效果。由于荧光增白剂会削弱人体免疫力及伤口愈合能力，一旦在人体中蓄积过量，除对肝脏造成危害外，还会诱发细胞癌变，是潜在的致癌因素之一。目前，中国荧光增白剂使用量最大的是洗涤剂，其次是纸张和纺织品。在卷烟工业中，荧光增白剂主要用于滤嘴接装纸和成型纸的增白，对人体健康存在潜在危害，故应对其用量进行控制。
我国现行《ＱＢ／Ｔ １０１４－２０１０食品包装纸》标准中明确规定：食品包装用纸张和一次性可降解餐饮具不得使用荧光增白剂；《ＧＢ １１６８０－１９８９食品包装用原纸卫生标准》中规定：纸中最大荧光面积不得大于５ ｍｍ２。虽然限量值不同，但均参照《ＧＢ／Ｔ ５００９．７８－２００３食品包装用原纸卫生标准的分析方法》进行检测。由于这种方法受人为、环境因素影响，易造成判断差异［２］。目前，纸包装材料中荧光物质的分析方法包括：薄层层析法、紫外分光光度法、分子荧光光度法、白度法和液相色谱法等［３］，其中薄层层析法［４］操作复杂，且只能半定量分析；紫外分光光度法［５］和分子荧光光度法［６］只能测定荧光增白剂的总量，而不能定性；白度法的定量限并未统一，且评判标准根据设备存在差异；液相色谱法［７－１２］易受荧光杂质的干扰，且分析成本较高［１３］。
本试验采用超高效液相色谱——荧光检测器法（ＵＰＬＣ－ＦＬD）对卷烟包装材料中的荧光增白剂ＡＢＰ和ＶＢＬ进行定性和定量研究，为建立卷烟滤嘴接装纸和成型纸中荧光增白剂的分析方法以及相关企业和监管部门提供技术参考。
１ 材料与方法
１．１ 材料
卷烟滤嘴接装纸、成型纸样品由本公司提供。
１．２ 仪器与试剂
Ａｃｑｕｉｔｙ超高效液相色谱仪（配ＦＬD检测器）、二元溶剂管理器和Ｅｍｐｏｗｅｒ２色谱工作站（美国Ｗａｔｅｒｓ公司）；Ｓ３００Ｈ超声波清洗器（德国Ｅｌｍａ公司）；微量进样器（５ μＬ）或自动进样器；ＢＴ ２２４Ｓ电子天平（德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）。
乙腈、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺（ＤＭＦ）为色谱纯；荧光剂标准品ＡＢＰ、ＶＢＬ纯度＞９９％，购于日本ＴＣＩ公司；去离子水；０．４５ μｍ有机相微孔滤膜（美国Ａｇｉｌｅｎｔ公司）。
１．３ 方法
１．３．１ 溶液配制 称取ＡＢＰ和ＶＢＬ各０．５００ ０ｇ，用Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺溶解ＡＢＰ、去离子水溶解ＶＢＬ，合并定容至１００ ｍＬ，摇匀，得ＡＢＰ，ＶＢＬ标准贮备液浓度均为５ ｍｇ／ｍＬ。以Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺为溶剂，稀释得０．０１、０．０５、０．１０、０．２０、０．５０、１．００ μｇ／ｍＬ ＡＢＰ和ＶＢＬ系列标准溶液。
１．３．２ 前处理 将卷烟滤嘴接装纸、成型纸样品剪成约０．５ ｍｍ×０．５ ｍｍ的纸屑，准确称取０．５００ ０ ｇ，置于５０ ｍＬ具塞三角瓶中，准确加入２５．０ ｍＬ Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺，超声３０ ｍｉｎ，经０．４５ μｍ有机滤膜过滤，待测。
１．３．３ 色谱分析 色谱柱为ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ C１８柱（５０ ｍｍ ×２．１ｍｍ， １．７ μｍ）；流动相Ａ为去离子水，Ｂ为乙腈，洗脱程序见表１，流速０．３ ｍＬ／ｍｉｎ；激发波长３５０ ｎｍ，发射波长４３５ ｎｍ；进样量５ μＬ。
２ 结果与分析
２．１ 提取条件选择
荧光增白剂具有复杂苯环结构，一般采用三氯甲烷、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺等萃取。预试验比较了三氯甲烷、Ｎ，Ｎ－二甲基乙酰胺、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺、四氢呋喃、无水甲醇、５０％（体积分数）甲醇、水等对接装纸、成型纸中ＡＢＰ、ＶＢＬ的提取效果。结果表明，Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺的提取效果最好，因此本试验选用Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺提取。考虑到要完全浸泡纸张，本项目选择提取液体积为２５ ｍＬ。
比较了不同温度（３０～６０ ℃）和时间（０～２４ ｈ）对ＡＢＰ和ＶＢＬ提取效果的影响，结果表明，ＡＢＰ和ＶＢＬ的稳定性较好，不受温度和时间的影响；考察了４０％功率超声条件下，不同温度（３０～６０ ℃）对萃取效率的影响，结果发现增白剂的提取效率与温度无关；考察了５～３０ ｍｉｎ、４０ ｍｉｎ、５０ ｍｉｎ和６０ ｍｉｎ不同超声时间的萃取效率，发现当超声时间大于１５ ｍｉｎ后，萃取效率最大。为避免长时间超声导致的样品温度升高，同时保证萃取效果，本试验确定超声时间为３０ ｍｉｎ。
２．２ 色谱分析
荧光增白剂ＡＢＰ、ＶＢＬ同时具有荧光发射和紫外吸收，且同属于双三嗪氨基二苯乙烯类化合物，由于荧光检测器灵敏度高于紫外检测器，故本试验选用荧光检测器。试验对激发波长（３００～３８０ ｎｍ），发射波长（４２０～４８５ ｎｍ）下对ＡＢＰ、ＶＢＬ标样进行扫描，结果发现ＡＢＰ、ＶＢＬ在３５０ ｎｍ激发波长、４３５ ｎｍ发射波长条件下检测灵敏度最大，故选择３５０ ｎｍ作为激发波长、４３５ ｎｍ作为发射波长。
采用上述色谱条件，ＡＢＰ、ＶＢＬ的混合标准溶液和样品加标的色谱图如图１、图２所示。
２．３ 线性关系
将标准溶液按上述色谱条件进样５ μＬ，以浓度ｘ（ｍｇ／Ｌ）对峰面积ｙ作回归分析，得到回归方程为：ＡＢＰ：ｙ＝２．０６×１０７ｘ－４．１×１０４，Ｒ２＝０．９９９ ６，线性范围０．０１～１．００ ｍｇ／Ｌ，按３倍信噪比计算检出限为０．１５ μｇ／Ｌ，按１０倍信噪比计算定量限为０．４２ μｇ／Ｌ；ＶＢＬ：ｙ＝２．５９６×１０７ｘ ＋ １．０１２×１０４，Ｒ２＝０．９９９ ９，线性范围０．０１～１．００ ｍｇ／Ｌ，按３倍信噪比计算检出限为０．２１ μｇ／Ｌ，按１０倍信噪比计算定量限为０．５６ μｇ／Ｌ；满足定量检测的要求。
２．４ 重复性
该方法的日内重复性和日间重复性用同一样品按照建立的方法每天测定６次，连续检测３ ｄ。结果表明，该方法的日内重复性ＲＳＤ＜５％，日间重复性ＲＳＤ＜５％，说明方法重复性良好。
２．５ 回收率
在空白样品中，按样品质量加入０．５０、１．００、１０．００ μｇ／ｇ水平的ＡＢＰ和ＶＢＬ标样，各测定３次，结果表明ＡＢＰ回收率在９５．１０％～９７．８０％之间，平均回收率为９６．４３％；ＶＢＬ回收率在９６．８９％～９９．８０％之间，平均回收率为９８．３９％，符合检测要求。
３ 结论
该文建立了卷烟滤嘴接装纸、成型纸中荧光增白剂ＡＢＰ、ＶＢＬ的ＵＰＬＣ分析方法。样品采用Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺超声提取，Ｃ１８柱分离，乙腈／水洗脱，荧光检测器检测，以保留时间定性，外标法定量。该法前处理操作简便，分离速度快，重复性好，回收率高，可应用于卷烟包装材料中的荧光增白剂ＡＢＰ和ＶＢＬ的检测分析。
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参考文献：
［１］ 宋艳茹，竹百均，蔡定汗，等．三聚氯氰在荧光增白剂工业中的应用与展望［Ｊ］．染料与染色，２００６，４３（５）：３４－３８．
［２］ 史海根，秦文勇．食品包装材料中荧光性物质检测浙江预防医学［Ｊ］．１９９９（１０）：２４．
［３］ 董仲生．造纸用荧光增白剂ＶＢＬ白度的测定［Ｊ］．化工标准·计量·质量，２００３（５）：２５．
［４］ ＪＡＳＰＥＲ Ｊ Ｌ， ＳＴＥＩＧＥＲ Ｐ Ｈ． Ａ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｏｐｔｉｃａｌ ｂｒｉｇｈｔｅｎｅｒｓ ｉｎ ｌａｕｎｄｒｙ ｄｅｔｅｒｇｅｎｔｓ ｂｙ ＴＬＣ ａｎｄ ＨＰＬＣ［Ｊ］． Ｊ Ａｍｅｒ Ｏｉｌ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ， １９９２， ６９（７）： ６２１－６２５．
［５］ 董仲生，沈日炯．用ＵＶ－ＶＩＳ分光光度计测定荧光增白剂ＣＸＴ强度的新方法［Ｊ］．染料工业，２０００，３７（２）：２７－２９．
［６］ 赵承礼，向仕学．荧光分光光度法测定餐具洗涤剂中荧光增白剂［Ｊ］．中国卫生检验杂志，１９９８，８（５）：２６３－２６６．
［７］ 余小兵，竹百均，王洪良，等．内标法测定荧光增白剂ＥＲ３３０％中ＥＲ的含量［Ｊ］．宁波高等专科学校学报，２００１，１３（９）：１１３－１１４．
［８］ 许 峰，马 磊，高忠林．高效液相色谱法和因子分析紫外光度法测定荧光增白剂中两种成分［Ｊ］．分析试验室，１９９７，１６（５）： １０－１３．
［９］ 孙边成，张 艳．高效液相色谱法测定面粉中荧光增白剂［Ｊ］．实用预防医学，１９９８，５（３）：１３６．
［１０］ 许 峰，金发根，何大森．荧光增白剂ＥＢＦ的高效液相色谱法分析［Ｊ］．化学世界，１９９５，３６（６）：３１３－３１５．
［１１］ 应 玲，许 峰，金发根，等．高效液相色谱法测定荧光增白剂ＯＢ［Ｊ］．分析测试技术与仪器，１９９５，１（２）：１５－１８．
［１２］ ＪＡＯ Ｍ Ｌ． Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｗｈｉｔｅｎｉｎｇ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｐａｐｅｒ ｃｏｎｔａｉｎｅｒｓ ｆｏｒ ｆｏｏｄ［Ｊ］． Ｊ Ｆｏｏｄ Ｄｒｕｇ Ａｎａｌ， １９９９，７（１）：５３－６３．
（责任编辑 周有祥）