李拥军
山东省淄博市中心医院输血科，山东淄博 255036
[摘要] 目的 探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值。方法 该院对320例受血者及供血者分别以盐水法和低离子聚凝胺技术(Manual Polybrene Test，MPT)进行交叉配血试验，分析比较两种方法的准确度、稳定性、灵敏度及平均耗时等情况。结果 盐水法平均耗时7.2 min，阳性检出率为1.88%（6/320），且6例阳性结果中只有3例在显微镜下可窥见到的特异性细胞凝集；MPT法平均耗时4.5 min，阳性检出率为4.06%（13/320），检出阳性的13例均可在显微镜下见到特异性细胞凝集。 结论 低离子聚凝胺技术在临床输血检验中具有操作简便、快速及准确度高、稳定性强、灵敏度高等优点，能有效减少输血反应，保证输血安全，具有较高的临床应用价值。
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关键词 低离子聚凝胺技术；输血检验；盐水法；应用价值
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１4）02（c）－０181-02
[作者简介] 李拥军（1965-），男，山东淄博人，本科，主管技师，主要从事临床输血工作，邮箱：leeyj12006@163.com。
随着医学的发展，输血已作为一种成熟的医疗手段，被广泛地应用于临床治疗和抢救过程中。输血过程中避免溶血性输血反应，保证输血安全是治疗的关键。因此，输血前需采用科学可靠的方法进行交叉配血试验，传统常用的盐水法虽然操作简便、成本低，但只能检出不相匹配的LgM抗体，而对不完全抗体IgM无法进行检出[1]，存在一定的局限性，无法满足大量需求和交叉配血时间紧迫。低离子聚凝胺技术 (Manual Polybrene Test，MPT)对IgM抗体和IgG抗体检验效果好，且试验过程简单、易于操作、结果准确、灵敏度高，便于常规和急诊配血。为了探究低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值，该院2012年1月—2013年1月对320例受血者及供血者采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验，并对比了两种方法的试验结果，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取该院收治的320例受血者为研究对象，其中男176例，女144例；年龄3~69岁，平均年龄35.5岁；320例患者无严重血液疾病，所有血样均采用盐水法和MPT法进行交叉配血试验。
1.2 试验原理
聚凝胺（又名溴化己二甲铵）是一种高价阳离子聚合物，当红细胞悬液中加入聚凝胺后，产生了大量正电荷，继而使得红细胞表面唾液酸所带的负电荷中和，提高了分子活性，使红细胞相互接近，并发生非特异性凝集。在加入重悬液后红细胞凝集散开，红细胞未被致敏的会出现可逆的非特异性凝集，属于阴性反应；在加入重悬液后红细胞凝集不散开，红细胞被致敏的会出现不可逆的非特异性凝集，属于阳性反应[2]，由此可特异性地检出相应的血型Ag或Ab(IgG、IgM)。
1.3 试剂与仪器
该研究中MPT法采用的聚凝胺介质试剂盒为珠海贝索生物技术有限公司产品，试剂有低离子溶液、重悬液、凝聚胺溶液等。盐水法选用普通生理盐水为介质。仪器：试管、显微镜、离心机、电热恒温水箱等。
1.4 方法
MPT法：取两支试管，分别标注受血者、供血者的姓名，区分主测管、次测管。加入2滴受血者血清、1滴3%的供血者红细胞悬液于主测管中，加入2滴供血者血清、1滴3%的受血者红细胞悬液于次测管中。然后，加入低离子介质0.7 mL于两支试管中，混匀，室温下静置1 min后加入2滴凝聚胺溶液，混匀，室温静置15 s，用离心机3 000 r/min（相当于1 000 g离心力）18 s，倒掉上清液，使管底剩余0.1 mL液体。轻摇试管，观察到试管出现明显凝集后，在主测管及次测管中滴入2滴重悬液，轻摇试管，再次观察试管中是否有红细胞凝集，如有则判断为阳性；若红细胞凝集消失，则判断为阴性。
盐水法：按照《全国临床检验操作规程》相关规定规范操作。盐水法与MPT法同步进行。
2 结果
采用盐水法和MPT法对320例血样进行交叉配血试验，结果显示，MPT法过程简单、操作简便，平均耗时4.5 min，明显少于盐水法（平均耗时7.2 min）。MPT法准确率高，320例中有13例检测结果呈阳性，阳性检出率为4.06%；稳定性强、灵敏度高，阳性结果中的13例样本在显微镜下均可见特异性细胞凝集。传统盐水法准确率相对较低，稳定性一般，灵敏度一般，320例样本中只检出6例阳性结果，3例可见特异性细胞凝集，阳性检出率为1.88%。见表1。
3 讨论
为了规范医疗机构合理用血，推广科学用血技术，保证临床用血的安全，国家卫生和计划生育委员会（原卫生部）于2000年6月根据《医疗机构临床用血管理办法》制定了《临床输血技术规范》，为输血医务人员提供正确、安全、规范地从事输血工作的纲领性文件[3]。凡输注全血、浓缩红细胞、红细胞悬液、洗涤红细胞、冰冻红细胞、浓缩白细胞、手工分离浓缩血小板等患者，应进行交叉配血试验，以避免溶血性反应，保证输血安全。因此，输血前必须对供血样本和受血者进行交叉配血试验，而交叉配血试验方法对试验结果有着重要的影响。目前临床常用的有盐水法、MPT法等，传统的盐水法虽然操作简单、费用低廉，但只能检出IgM抗体，不能检出不配合的IgG抗体，这就降低了准确率，一旦造成漏检就可能引起输血反应。可见，盐水法准确率不高，且无法满足临床应用的需求。而MPT法能检出完全抗体和不完全抗体，能促进红细胞及不规则抗体的反应[4]，且此方法灵敏度高、准确度高，操作简单、价格低廉，适合基层医院广泛应用。MPT法作用原理是通过低离子介质降低介质的离子强度，从而促进红细胞和相应抗体发生反应。在MPT法试验过程中，红细胞悬液中滴入聚凝胺溶液后，产生大量正电荷，继而使得红细胞表面的负电荷中和，红细胞表面的电位降低，从而提高了分子活性，使得红细胞发生非特异性凝集，当加入重悬液后，凝集现象不消失。
该组试验通过对比盐水法和MPT法的临床应用，得出盐水法虽然操作简单、成本低，但其检测不出不规则抗体，对ABO以外的抗体不能检测，其中不规则的抗体大多为IgG类，主要是由于免疫刺激、输血、妊娠产生，通过盐水法不能被凝集，只有被致敏的相应抗原才能够出现凝集[5]。而MPT法不仅操作简单、费用低廉，更重要的是能同时检出完全抗体和不完全抗体，避免迟发性溶血反应发生，避免漏检，可为临床治疗诊断提供参考依据[6]。该研究过程中发现聚凝胺法是从凝集到无凝集的一个发生过程，因此，试验过程中要注意解聚的时间和掌握试管振摇的力度。MPT法平均耗时4.5 min，略少于祁蕙燕[7]研究中的6 min，应考虑样本数量及试验人员操作成熟度的影响。该组盐水法、MPT法的阳性检出率均略高于龙亚银[8]的研究数据，应考虑检验样本中有无溶血性患者及长期输血史患者，溶血性患者及长期输血患者所占比例越高，阳性检出率越高。因此，MPT法与盐水法具有准确性高、稳定性强、操作简单等优点，可快速准确的检测出不规则抗体IgG，不会发生漏检现象，具有很好的应用价值，值得在各医院推广使用。
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参考文献
[1] 陈欣荣.交叉配血方法应用效果评价[J].中国医药指南，2013，11(8):574-575.
[2] 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社，2006:258.
[3] 赖顺华，蔡国斌，徐小丹.浅谈低离子聚凝胺技术在临床输血检验中的应用价值[J].中国医药指南，2012，10(33):96-97.
[4] 叶旭英，曹颖.低离子聚凝胺用于输血检验价值分析[J].中外医学研究，2013，11(11):45-46.
[5] 秦江萍.低离子凝聚胺技术在临床输血检验中的应用[J].现代诊断与治疗，2012，23（12）：2207-2208.
[6] 许子珍.聚凝胺配血法与盐水交叉配血法的应用效果比较[J].吉林医学，2013，34（23）：4775.
[7] 祁蕙燕.聚凝胺交叉配血试验在临床输血中的应用体会[J].青海医药杂志，2012，42(11):59-60.
[8] 龙亚银.低离子聚凝胺法与盐水法交叉配血效能的比较[J].广东医学院学报，2003，21(4):372-373.
（收稿日期：2014-01-22）