易春梅
湖南怀化市第一人民医院检验科，湖南怀化 418000
[摘要] 目的 了解铜绿假单胞菌感染的分布与耐药的情况，为指导临床合理用药提供实验室依据。方法 采用法国梅里埃ATB Expression细菌鉴定药敏分析仪对我院2012年5月—2013年5月所分离出的铜绿假单胞菌的药敏结果进行回顾性分析。结果 共分离出铜绿假单胞菌386株，其中痰及咽拭子共分离出243株，其构成比为62.95%，同时分布最多的科室为重症监护室与呼吸科.分离菌株的耐药性较为严重，其中对头孢唑啉、头孢噻肟钠、替卡西林、头孢呋辛的敏感率较低，其敏感率分别为：7.25%、33.16%、38.86%、42.75%。结论 铜绿假单胞菌在医院内感染及耐药性已十分突出，临床用药应在药敏实验的基础上选择敏感性好的抗菌药物进行合理用药，避免耐药菌的产生。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ] 铜绿假单胞菌；耐药；分析
[中图分类号] R446.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）07（a）-0009-03
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aerugonosa，PA）是临床上较为常见的一种条件致病菌，即只在当机体处于恶性肿瘤，血液病等抵抗力低下或者受到侵袭性操作治疗时，易侵入机体引发感染[1]。铜绿假单胞菌在临床标本中的分离率仅次于大肠埃希菌而排在第二位，其主要引发的感染有肺部感染、心内膜炎以及败血症等，且由于菌体往往很难除，常引起感染的反复发作[2-3]。近年来，由于免疫抑制剂以及激素的的长期大量应用，尤其是抗生素的滥用，导致铜绿假单胞菌的而药性日趋严重[4-5]，因此针对PA的高分离率、高病死率以及高耐药性的威胁，本文对我院2012—2013年间临床微生物实验室分离的铜绿假单胞菌的分布特征和耐药情况进行了回顾分析，现将结果报道如下。
1材料与方法
1.1标本来源
从我院2012年5月—2013年5月门诊与住院的各类标本中痰、咽拭子、中段尿、胸腹腔积液、脑脊液、血液以及各类分泌物及引流液，分离出386株铜绿假单胞菌，此次统计标本量不包含同一患者多次分离菌株。
1.2菌株分离与鉴定
按《全国临床检验操作规程》[6]对标本进行接种，分离，鉴定。采用标准菌株铜绿假单胞菌ATCC27853和大肠埃希菌ATCC25922做为质控菌株。
1.3药敏实验
病原菌耐药试验采用法国梅里埃ATB Expression及ATB G-5肠细菌药敏试剂盒（CODE：14335， DESCRIPTION：ATB UR 5, 25 STRIPS；生产企业：bioMerieux，sa，国家：法国），全自动微生物分析系统VITEK-2仪,革兰阴性杆菌鉴定卡(GN)、药敏卡(AST-GN10)均为法国生物梅里埃公司产品。K-B法药敏纸片均为英国Oxoid公司产品。采用K-B法,Muller-Hinton琼脂培养基,药敏纸片为复方新诺明、庆大霉素、四环素、环丙沙星、哌拉西林、头孢他啶、头孢噻肟、阿米卡星、头孢吡肟、左氧氟沙星、加替沙星、头孢西丁。均为英国OXOID公司提供,以ATCC27853铜绿假单胞菌为质控菌株,以美国临床实验室标准化委员会标准为药敏判读标准。
1.4统计分析
用率、构成比进行统计学描述分析，对计数资料进行χ2检验统计分析，其中“中介”的药敏结果在统计过程中归入耐药的范围。
2结果
2.1标本来源分布情况
2012年5月—2013年5月共分离出386株铜绿假单胞菌，其中痰液来源的标本最多，共243株，占总标本来源的62.95%。具体构成比的分布情况如图1所示。
2.2标本科室分布情况
铜绿假胞菌于ICU（重症监护室）的分布最多共计155株，所占构成比为40.16%。于呼吸科所占比例仅次于ICU，共计95株，所占构成比为24.61%。其在各临床科室的具体分布情况请见表1。
2.3铜绿假单胞菌的分离率
2012—2013年间，从1936株革兰染色阴性杆菌中，共分离出铜绿假单胞杆菌386株，总分离率为19.94%，且每月的分离率差别无统计医学意义（P>0.05）。本年度每月铜绿假单胞菌的具体分离率如图2所示。
2.4 铜绿假单胞菌的药物敏感率
386株铜绿假单胞菌均进行了16种常用抗生素的药敏检测，其具体检测敏感率和耐药菌株数见表2。
3 讨论
铜绿假单胞菌是目前临床上最重要也是最为常见的假单胞菌，其存在的重要条件是潮湿的环境，因此在人体的呼吸道、皮肤以及肠道中较为常见，同时其也是一种较为常见的引发医院内感染的条件致病菌之一[7-8]。
从图1可见，于2012年5月—2013年5月痰及咽拭子检出的铜绿假单胞菌的构成比为62.95%，而其在创伤分泌物中的分布仅次于痰及咽拭子占13.21%，因此与相关文献报导相一致的是铜绿假单胞菌主要引起呼吸道、烧伤创面及伤口的感染[5]。同时由表1的数据，可以发现由于患者存在抵抗力低及基础性疾病造成铜绿假单胞菌具有明显的科室或病区集中趋势，其在重症ICU及呼吸科的构成比分别为40.16%和24.61%。
从药敏结果中可以看到铜绿假单菌对碳青酶烯类抗菌药物如亚胺培南、美洛培南及头孢菌素/酶抑制剂复合药如头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感性高，敏感率分别为83.16%、87.56%、78.24%、81.35%。这主要是由于碳青酶烯类抗菌药物与其他抗生素相比，对于β-内酰胺酶更具有耐受性，而与青霉素结合蛋白又具有很强的亲和力，这使其具有较高的抑菌活性，同时被用来治疗院内多重耐药菌及重症感染[9]。而β-内酰胺酶抑制剂的复合药物由于具有抑制β-内酰胺酶的活性，从而与单药成份相比，其对于产β-内酰胺酶的耐药菌株的敏感性要明显增强[5]。阿米卡星属于氨基糖苷类抗生素，其抗菌效果较好，但由于其有一定的肾毒性及对耳毒性[3-5]，因此临床上较少单独使用，往往联合其他药物使用。同时本文数据显示，铜绿假单菌对于头孢吡肟及替卡西林的耐药性分别为43.52%、61.14%，说明本地区多重耐药的铜绿假单胞菌的产生较为严重，在临床治疗过程中应该引以为重。
铜绿假单胞菌的耐药机制较复杂，据相关研究报道携带各种β-内酰胺酶编码基因和外膜通道蛋白oprD2基因缺失是导致铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要原因[10]。耐药株产生的β-内酰胺酶以AmpC和ESBLs为主，由于AmpC酶是一类可被β-内酰胺类抗生素诱导的头孢菌素酶，因此头孢曲松、头孢噻肟的高耐药率除细菌本身的生物学特征外，还可能与第三代头孢菌素在临床作为抗感染一线药物广泛应用而导致铜绿假单胞菌产生高水平染色体介导的Ampc酶有关[11-12]。
综上所述，我院铜绿假单胞菌的耐药性较为严重，因此临床用药要尽可能以药敏结果为指导，同时要做到院内感染细菌的耐药性监测。尽可能规避抗生素的滥用造成的耐药菌株的产生。且应当尽可能规避广谱抗生素的长期使用，进而在提高临床治疗疗效的同时又可防止耐药菌株的产生。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献]
[1] Bonfiglio G, Lakani Y, Franchino L, et al. Mechanisms of bata-lactam resistance Pseudomonas aeruinosa isolated in an Italian survey [J]. J Antimicrob chemother, 1998，42(6):697-702.
[2] Strateva T, Yordanow D. Pseudomonas aeruginosa – a phenomenon of bacterial resistance[J].Med Microbiol, 2009,58(Pt9): 1133-1148.
[3] 吴立明,王平．380株铜绿假单胞菌的耐药性分析[J]．中华医院感染学杂志，2012,22(88): 1705-1706.
[4] 周立新,张秀平,方滨. 重症监护病房感染患者铜绿假单胞菌的分离与耐药性分析[J]. 中华医院感染学杂志,2004,14(7):807-808.
[5] 阮卫. 铜绿假单胞菌耐药机制的研究进展[J]. 国外医学临床生物化学与检验学分册,2004,25(6):536-538.
[6] 王军,张建菊,刘华，等.铜绿假单胞菌致慢性阻塞性肺疾病患者肺部感染的危险因素及耐药性调查[J].中华医院感染学杂志,2011,3(3):457-458.
[7] 马越,李景去,张新妹. 2002年临床常见细菌耐药性监测[J].中华检验医学杂志,2004,27(1):38-45.
[8] 陈林珍,李瑞莹,曾智华.489 株铜绿假单胞菌的感染分布和耐药监测[J].检验医学与临床,2012,9(8):928-929.
[9] 赵丽瑞,袁恒杰.碳青霉烯类抗菌药物耐药机制研究进展[J].中国药房,2012,23(40):3828-3830.
[10] 陈华彬,王冬国,王红戟.多药耐药铜绿假单胞菌耐药基因的研究[J].中华医院感染学杂志,2013,3(3):488-491.
[11] 杨玉杰,于魁忠,张丽君，等.铜绿假单胞菌耐药性分析及医院感染控制对策[J].中华医院感染学杂志,2013,23(15):3755-3756.
[12] 龙绍芬,黎铁斌.铜绿假单胞菌的耐药性分析与医院感染控制措施[J].中外健康,2011,8(24):1672-5082.
（收稿日期：2014-05-21）