戴光跃
临沧市人民医院检验科，云南临沧 677000
[摘要] 目的 研究探讨血培养中病原菌的分布情况，并分析其耐药性。方法 整群选取临床送检的5 010份血标本为研究对象，做常规血培养，并对培养阳性标本中的病原菌进行分离和鉴别，统计不同菌株的耐药情况。 结果 5 010份血液标本经血培养共获得病原菌498株，血培养阳性率为9.9%。其中，革兰氏阴性菌检出率最高，为51.2%，常见菌株对亚胺培南和美罗培南耐药性较低，革兰氏阳性菌（38.2%）则对替加环素、万古霉素、利奈唑胺均无显著耐药性，常见真菌（10.6%）对大部分药物耐药性都比较低。结论 血培养阳性的病原菌以革兰氏阴性菌为主，对多数常见药物都有耐药性，临床治疗过程中要以病原菌鉴别、耐药结果为实验依据提高用药合理性。
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关键词 ] 血培养；病原菌；耐药性
[中图分类号] R446 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１5）08（b）－０188-02
[作者简介] 戴光跃（1973.10-），男，云南凤庆人，本科，主管检验师，研究方向：临床微生物、PCR核酸检测。
血液感染是十分严重的全身感染性疾病，具有病情危重、死亡率高的特点[1]，血培养就是临床判断血液是否发生感染的重要手段，血培养阳性结果是急诊救治疾病，挽救患者的生命的基础。特别是临床各种广谱抗生素、免疫抑制剂的广泛使用和侵袭性操作的增加，都使得血液感染发生率不断增加[27]。血液感染的发生不仅给患者的临床治疗造成了极大的干扰，影响预后恢复，还造成了医疗资源的浪费，增加了患者的经济负担。因而，了解病原菌的分布与耐药情况获得可靠的数据支持对于促进临床合理用药，提高血液感染治疗有效率都有重要意义。该研究整群选取2013年1月—2014年12月送检的5 010份送检血液标本为研究对象，研究病原菌的分布，并对不同病原菌对常见抗生素的耐药情况进行分析、对照，研究探讨血培养中病原菌的分布情况，并分析其耐药性，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
整群选取2013年1月—2014年12月临床送检的5 010份血标本为研究对象，采集过程严格无菌，且标本合格，每份标本10 mL（儿童5 mL）[3]。将其注入专用血培养需氧/厌氧瓶中混合均匀并立即送检。
1.2 方法
严格按照《全国临床检验操作规程》[4]中的规定对送检标本进行培养、分离、鉴别和耐药性分析的各项实验操作。其中血培养采用法国梅里埃全自动细菌分枝杆菌培养系统及配套的血培养瓶进行；病原菌的培养与鉴定采用法国梅里埃全自动细菌鉴定药敏培养仪VITEK-2 compact进行，当仪器检验报告结果呈阳性情况时，立即转种血平板和麦康凯平板，在孵箱内对其进行培养，设定培养温度为37℃，培养时间为24 h。与此同时，对涂片进行常规格兰仕染色和镜检。
药敏试验采用K-B纸片扩散法进行，参照美国临床实验室标准化委员会制定的相关标准（M100-S17规定的折点）对实验结果进行分析[5-6]，并判断病原菌的耐药性和敏感性。质控菌株由卫生部临床检验中心提供：大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞杆菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黄色葡萄糖球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212、表皮葡萄球菌ATCC12228。
1.3 统计方法
该次实验数据采用spss12.0软件进行统计学分析，计数资料对比采用χ2检验。
2 结果
2.1 病原菌检出情况
5 010份血液标本经血培养后共获得病原菌498株，血培养阳性率为9.9%。其中，革兰氏阴性菌255株，检出率为51.2%，革兰氏阳性菌190株，检出率为38.2%；真菌53株，检出率为10.6%。在革兰氏阴性菌中，检出率最高的是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞杆菌，分别占23.1%(115/498)、13.1%(65/498)、7.8%(39/498)；在革兰氏阳性菌中，检出率最高的是表皮葡萄球菌、金黄色葡萄糖球菌、粪肠球菌，分别占15.5%(77/498)、12.2%(61/498)、5.4%(27/498)；在真菌中，检出率最高的是白色念珠菌、季也蒙念珠菌和热带念珠菌分别占6.2%(31/498)、2.0%(10/498)、1.6%(8/498)。
2.2 不同类型病原菌的耐药性分析
对常见三种革兰氏阴性菌的耐药情况进行分析可见，大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞杆菌都对哌拉西林、氨苄西林有较高耐药性，而对亚胺培南和美罗培南有较高的敏感性，特别是大肠埃希菌，敏感率可达100.0%，比较大肠埃希菌对耐药率最高和最低两种药物（哌拉西林和亚胺/美罗培南）的耐药性，χ2=63.882，P＜0.05；比较肺炎克雷伯菌对氨苄西林和亚胺培南的耐药性，χ2=68.001，P＜0.05；比较铜绿假单胞杆菌对哌拉西林的耐药性，χ2=5.003，P＜0.05。比较均差异有统计学意义。见表1。
对常见革兰氏阳性菌耐药情况进行分析可见，表皮葡萄球菌、金黄色葡萄糖球菌等都对庆大霉素有较高的耐药率，除此之外，三种菌株对左氧氟沙星和莫西沙星均有较高耐药率，而其对替加环素、万古霉素以及利奈唑胺的耐药性均为0，敏感率100.0%，可以获得良好的治疗效果 。比较表皮葡萄糖球菌对常见药物的耐药性，χ2=23.128，P＜0.05；比较金黄色葡萄糖球菌对各药物的耐药性，χ2=18.901，P＜0.05；比较粪肠球菌对各药物的耐药性，χ2=48.623，P＜0.05。比较差异有统计学意义。见表2。
对常见真菌耐药情况进行分析可见，除季也蒙念珠菌对伊曲康唑具有较高的耐药性外，几种真菌对常见抗真菌药物的敏感性都比较高，在临床用药过程中具有很大的选择范围。比较白色念珠菌对常见药物的耐药性，χ2=1.007，P＞0.05；比较季也蒙念珠菌对各药物的耐药性，χ2=2.032，P＞0.05；比较热带念珠菌对各药物的耐药性，χ2=2.321，P＞0.05。比较差异均无统计学意义。见表3。
3 讨论
血流感染属于临床常见的重症感染性疾病，通常情况下具有起病急、致死率高的特点[7]。血培养的目的在于为临床判断血液是否发生感染提供病原学依据，直接关系到疾病的诊断和治疗。对血培养结果进行鉴别，并对医院常规使用的抗生素进行耐药性分析，对于败血症、菌血症等多种严重感染性疾病的临床诊治都有重要意义，近年来，血培养阳性率一直呈现出不断上升的趋势，虽然第三代头孢菌素药物、氟喹诺酮类抗生素等的出现与广泛应用使得革兰氏阴性杆菌败血症的临床发病率有所降低，但革兰氏阳性菌败血症的发生率却呈现出不断上升的趋势。调查研究数据显示，在上世纪70年代，临床常规血培养分离得到的格兰仕阴性杆菌的比例高达75%[8]，但近年来血培养的分离结果却显示，革兰氏阳性球菌感染检出率越来越接近格兰仕阴性杆菌。该文对5 010份血标本进行培炎后，检出498株病原菌菌株，其中革兰氏阴性杆菌和革兰氏阳性球菌等的检查率分别为51.2%和38.2%，与上述结论基本一致。此外，还有极少数真菌感染的情况，本文真菌检出率为10.6%，在临床诊断与治疗中也应得到一定的重视。与郭秀臣等[1]的研究结果相比，该院血培养结果中的真菌检出阳性率略高，而革兰氏阳性球菌的检出阳性率略低，与刘耀婷等[3]的研究结果相比，则革兰氏阳性球菌的检出率略高，造成不同研究的差异可能与医院的环境、患者的患病情况等多种因素有关。
该文的血培养结果显示，革兰氏阴性菌为其主要致病菌，且以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌所占比例最高，经耐药性监测可见，常规头孢类药物、青霉素类药物以及喹诺酮类药物均有较高的耐药性，相对而言，亚胺培南和美罗培南的耐药率低，可以作为治疗革兰氏阴性菌感染的药物。而常见革兰氏阳性菌中，以表皮葡萄糖球菌和金黄色葡萄球菌所占比例最高，其对替加环素、万古霉素、利奈唑胺等的敏感率均可达100.0%，可直接用于治疗中。而少数真菌菌株则对大多数的真菌治疗药物均有较低的耐药性，治疗药物的选择范围相对较广。
总的来说，根据血培养阳性标本的细菌培养鉴别和药敏试验可以为临床抗生素的选择提供依据，并提高血液感染的治疗有效率，意义重大。
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参考文献]
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[8] 李娟，冯锴，李艳，等．血培养病原菌种类分布和耐药性分析[J].国际检验医学杂志，2012，33（1）：79-80．
（收稿日期：2015-05-15）