李 凌
遂宁市民康医院检验科，四川遂宁 629000
[摘要] 目的 分析比较全自动干片式和湿化学生化分析与检测指标的结果。方法 将取得的各血清样本分成两份，在两种分析系统中同时测定。每天收集6份样本，以1→6、6→1的顺序测定，确保操作时间小于2 h，对采集的样本连续测定，并记录结果。结果 两种仪器测量相同浓度乳酸脱氢酶、谷草转氨酶存在1个离群点，根据文件进行消除。结论 利用全自动生化分析仪及干式生化分析仪检测系统实施检测，其结果准确可比性在医学实验室认可标准中，是一项意义显著的技术因素。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
关键词 ] 生化指标；干湿生化分析仪；对比
[中图分类号] R4[文献标识码] A[文章编号] 1672-5654（2014）05（c）-0157-02
寻找各检测系统之间的结果差异性和溯源性能够很大程度上降低由自建检测系统引起的实验误差[1]。基于此，2012年3~6月，我院依据美国临床以及实验室标准协会相关资料标准[2]，针对本科室内干式生化分析仪和全自动生化分析仪在TP、GGT、ALB、ALT、TB、CK、ALP等方面进行了对比研究，以期在日后不同检测系统彼此结果的比对奠定基础。
1 资料与方法
1.1一般资料
于院内门诊部收集患者新鲜血清，每天6份，共收集42份。检测系统分别是:德国 SIEMENS ADVIA2400 全自动生化分析仪(简称S)，项目试剂采用上海华臣生物试剂 有 限 公 司 ( 批 号: CKMB:02CKMB12195；LP:01ALP12154；AST:01AST12203；CK:2CK12195；GGT:01GGT12375；ALT:01ALT12242；ALB:02ALB12154；TP:02TP12372；LDH:02LDH12125)，TB 试剂采用上海科华生物工程股份有限公司(批号:20120422)；日本FUJI DRI-CHEM7000 全自动干式生化分析仪(简称 F)及原装干片试剂(批号:TB:496609；GGT: 395511；AST:499407；CK:494010；CK-MB: 187310；ALP: 102909； ALT:401606；ALB:194708；TP:498206；LDH:392701)。质控品:上海长征(批号:759UN)；校准品:上海华臣(批号:12101)。
1.2方法
1.2.1检测方法由于SIEMENS全自动生化分析仪系统是一种能够溯源的封闭系统，需要校准[2]，其结果更加准确，所以以S为比较方法，F干式生化分析仪为实验方法。实验开展前需对其进行传统保养，并对其校准和质量控制，室内质量控制在控制过程中实施标本测定。将取得的各血清样本分成两份，在两种分析系统中同时测定。每天收集的6份样本，以1→6、6→1的顺序测定，确保操作时间小于2 h，对采集的样本连续测定，并记录结果。
1.2.2统计方法①离群值检查。根据EP9-a2文件开展方法内和方法间离群值检测[3]。方法内：对各样本及各仪器测定的结果取其平均值和绝对值，限定其平均绝对差值的4倍数值，若大于此值，为离群点；方法间：取一种样本在两种系统间结果的平均值和绝对差值，限定其平均绝对差值，若大于此值，为离群点。如果离群点数量为1，应将其除去，若大于1，应分析其原因并再次采集数据。
②比较方法（X）。通过相关系数r的估算来校验测定范围。如果r值大于或等于0.975，那么X值处于合理范围，其存在误差也被抵消。
③线性回归方程。此研究中线性回归方程检测方法如下：实验方法Y=bX+a。
④偏倚评估。通过带入相关指标的医学决定水平（MDI）浓度X到回归方程中，可得到实验方法（Y）与比较方法（X）的存在误差（SE）以及相对偏倚(SE%),其计算公式为SE=|Y-X|，SE%=SE/X*100%。如果SE%小于或等于1/2美国临床医学检验部门修正法规（CLIA，88）允许总误差（1/2CLIA，88Tea）作为临床可接受性能的评判指标，那么两种检测系统取得的对比结果有统计学意义。
2 结果
2.1离群值检查
利用两种仪器反复测定上述各项指标结果未发现离群点，两种仪器测量相同浓度乳酸脱氢酶、谷草转氨酶存在且只存在1个离群点，根据文件进行消除。
2.2不同检测系统测定结果的相关性与回归分析
干式生化分析仪各项指标回归方程如下：Y（TP）=1.1864X-8.8542、Y（ALB）=0.9464X+4.5643、Y（ALT）=0.8427X+1.9560、Y（GGT）=1.0810X+4.5375、Y（TB）=0.9327X－0.0041、Y（ALP）=2.8245X+31.5478、Y（AST）=0.8547X+5.4537、Y（LDH）=1.4523X－14.7865、Y（CK）=0.94528X+18.4357、Y（CKMB）=1.2378X+2.0183，与全自动生化分析仪彼此相关系数r值为r(TP)=0.999、r(ALB)=0.993、r(ALT)=0.999、r(GGT)=0.998、r(TB)=0.999、r(ALP)=0.999、r(AST)=0.998、r(LDH)=0.992、r(CK)=0.998、r(CKMB)=0.998。
2.3不同检测系统偏倚评估
本次研究涉及到的指标基于限定医学决定水平（X）以干式生化分析仪为实验方法，全自动生化分析仪得到SE和SE%，如下表1所示。
3讨论
由结果可知，干式生化分析仪有关血清总胆红素、血清LDH、肌酸激酶同工酶在MDI上的SE%小于1/2CLIA´88Tea，其检测结果比较具有统计学意义，但谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶正好相反，因此其结果无可比性。总蛋白处于高值，清蛋白位于低值，SE%都大于1/2CLIA´88Tea，并且随着总蛋白值升高偏倚增大，清蛋白与之相反，且使用的方法一致，可见血清样本中高值总蛋白和低值清蛋白无大关系。谷氨酰转肽酶、丙氨酸氨基转移酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶和肌酸激酶在每项MDI中都发生SE%偏倚，可能是受到不同检测系统的检测方法影响。全自动生化分析仪检测谷氨酸转肽酶是根据其受到双甘氨肽影响使L-r-谷氨酰-3-羧基-4-硝基酸苯胺的L-r-谷氨酰基发生转移，到达双甘氨酞，借助黄色硝基苯甲酸的生成速度得到谷氨酰转肽酶活性值；而与之相对的干式生化分析仪是借助提高P-硝基苯胺吸光度，从而取得谷氨酰转肽酶活性值[4]。干式生化分析仪通过速率法测定丙氨酸氨基转移酶、谷草转氨酶、肌酸激酶；全自动生化分析仪对前两者使用酶法，后者处于低值的SE%大于1/2CLIATEa，可能受由于受到样本浓度范围影响。涉及到的项目r值均大于0.975，说明这两种仪器通过其各自分析方法获得的结果具有较好相关性。
本次研究的两种测定方法所需血清样本形式存在差异，其中干化学法需使用干片血清，湿化学法需使用液体血清[5]。湿化学原理是通过所用试剂和样品产生的显色反应中颜色的各项指标差异，依照Lambert-Beer定律得出样本浓度。干化学，也就是固相化学，其将试验中涉及到的所有或某些试剂在载体中固定，基于Kubelka-Munk理论，得到反射率（R）。这一过程需要使用的数值分别是固相层厚度（X）、一个厚度单位能够吸收的光系数（K）、固相反应层散射系数（S）。如果固相层厚度和固相反应层散射系数固定，那么反射率只与单位光吸收系数有关，并且单位光吸收系数数值与样本浓度呈正比，通过这些数值的获得，能够得出样本浓度[6]。干式生化分析需要的干片共有三层。通过多层膜技术可以覆盖样本有色物质并建立背景，筛选出干扰性物质[7]。同时各层中还能够进行基于湿化学反应基础上的各种生物反应，从而打破层与层之间的间隔，实现共同反应，形成反应系列，并且在每一层中还能够指定环境来实现反应系列和时间的双重控制。利用压力感受系统来实现以期吸样步骤的控制，避免样品固化或样品量不足导致的结果误差。干片、加样枪吸头不可二次使用，所以，避免蒸馏水洗涤，彻底根除了样品间与干片间彼此影响的可能性。本次试验开展基于NCCLS的EP9-a2文件，分析科室内两种检测系统检测结果，对此事件实施整体质量控制，确保其相关数据的准确性[8]。
人民生活质量提高的最显著表现就是在医疗水平方面的需求不断增长，对于检验医学结果质量的准确性也有所提高，人们更加注重检测系统的实际意义。通过上述两种检测系统实施检测，其结果准确可比在医学实验室认可标准中，是一项意义显著的技术因素，而这些都是建立在对比试验基础上为医疗事业提供更大的支持。
[教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献]
[1]李鸿飞，邱广斌.常用生化指标干化学与湿化学检测结果的比较分析[J].检验医学与临床，2013（1）：109-111.
[2]张静，刘英丽，于勇.血气分析仪和干式生化分析仪测定血钾水平差异的分析[J].感染·炎症·修复，2010（2）：106.
[3]郑智君，韩玉涛.不同试剂添加方式对生化试验结果影响的探讨[J].临床肺科杂志，2013（9）：1718-1719.
[4]李小林.贝克曼生化仪在贫血患者的血液检验[J].医学检验与临床，2012（2）：93.
[5]秦建梅，陶桂云，李明淑，等.白银市9054例健康体检人员部分生化指标的分析研究[J].中国卫生检验杂志，2011（7）：1779-1782.
[6]蔡迪娅，常艳敏，张伟，等.干、湿生化分析仪检测部分生化指标的比较[J].山东医药，2013（28）：87-89.
[7]赵春娥，王惠云.干、湿生化分析仪部分急诊项目检测结果的分析[J].医学信息：上旬刊，2012（7）：554-555.
[8]张韶斌，陈斯亮，罗莞超.干、湿生化分析仪部分项目检测结果的比对分析和偏倚评估[J].临床医学工程，2012（3）：325-327.
（收稿日期：2014-02-25）