摘 要：目的：探讨艾滋病合并真菌感染患者自然杀伤(NK)细胞亚群与炎性因子水平的相关性。方法：回顾性分析2020年1月—2021年6月湖北省英山县人民医院收治的艾滋病患者的临床资料，依据其是否合并真菌感染将其分为非真菌感染组(40例)及真菌感染组(70例)，并选取同期30例体检健康者的体检资料作为对照组。所有研究对象进行NK细胞亚群及炎性因子水平检测，比较三组NK细胞亚群分布及炎性因子表达情况，分析NK细胞亚群与炎性因子水平的相关性。结果：非真菌感染组及真菌感染组外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK水平低于对照组，真菌感染组CD56 bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK水平低于非真菌感染组，差异有统计学意义(P<0.05)。非真菌感染组及真菌感染组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-6(IL-6)水平高于对照组，真菌感染组血清TNF-α、IL-10、IL-8、IL-6水平高于非真菌感染组，差异有统计学意义(P<0.05)。血清TNF-α、IL-10、IL-6水平与外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、NK水平呈负相关关系，血清IL-8与外周血CD56-CD16+NK水平呈正相关关系(P<0.05)。结论：在艾滋病合并真菌感染患者中，随着病情进展外周血NK细胞亚群水平降低，炎性因子水平升高，且NK细胞亚群与血清炎性因子水平存在显著的相关性。
关键词：艾滋病；真菌感染；NK细胞亚群；炎性因子；
艾滋病是常见的传染性疾病，主要表现为腹泻、皮疹等，若患者未能及时采取治疗措施，则可出现免疫功能受损，引发真菌感染[1,2]。自然杀伤(NK)细胞亚群为免疫功能指标，可较为敏感地反映出身体的免疫功能状态[3]。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-6(IL-6)均为炎性因子指标，可反映身体的炎性反应状态。艾滋病合并真菌感染可刺激身体引发炎性反应，造成炎性损伤，加重患者的病情[4]。本研究旨在探讨艾滋病合并真菌感染患者NK细胞亚群与炎性因子水平的相关性，现报告如下。
资料与方法
回顾性分析2020年1月—2021年6月湖北省英山县人民医院收治的艾滋病患者的临床资料，依据是否合并真菌感染将其分为非真菌感染组(40例)及真菌感染组(70例)，并选取同期30例体检健康者的体检资料作为对照组。对照组男23例，女7例；年龄21～55岁，平均(36.31±2.23)岁；病程1～10年，平均(4.32±1.21)年。非真菌感染组男30例，女10例；年龄20～56岁，平均(36.52±2.17)岁；病程1～10年，平均(4.56±1.33)年。真菌感染组男55例，女15例；年龄20～57岁，平均(36.48±2.36)岁；病程1～9年，平均(4.11±0.87)年。三组患者基本资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经院医学伦理委员会审核批准。
纳入标准：(1)非真菌感染组及真菌感染组符合《中国艾滋病诊疗指南(2018版)》[5]中的诊断标准，且经过临床检查确诊者；(2)伴有腹泻、皮疹等症状者；(3)无严重心、脑等器官疾病者。
排除标准：(1)有梅毒螺旋体感染者；(2)血培养除真菌外的其他细菌阳性者；(3)结核分枝杆菌感染者。
方法：所有研究对象抽取空腹外周肘静脉血约5 m L。(1)NK细胞亚群检测：使用流式细胞仪(生产厂家：BD公司，型号：FACSCalibur)检测外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK水平。(2)炎性因子水平检测：采血方式同上，待其凝固后将其置于离心机中(3 000 r/min,10 min)进行离心，取上清液。血清TNF-α、IL-10、IL-8、IL-6水平检测使用酶联免疫吸附法。
观察指标：(1)三组NK细胞亚群分布情况；(2)三组炎性因子表达情况；(3)分析NK细胞亚群与炎性因子水平的相关性。
统计学方法：数据运用spss 22.0统计学软件分析；计量资料以±s表示，采用t检验；多组比较采用重复测量方差分析，相关性分析以Pearson相关系数分析；P<0.05为差异有统计学意义。
结果
三组NK细胞亚群分布情况比较：非真菌感染组及真菌感染组外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK水平低于对照组，真菌感染组CD56bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK水平低于非真菌感染组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
表1 三组NK细胞亚群分布情况比较(±s，个/μL)
三组炎性因子表达情况比较：非真菌感染组及真菌感染组血清TNF-α、IL-10、IL-8、IL-6水平高于对照组，真菌感染组血清TNF-α、IL-10、IL-8、IL-6水平高于非真菌感染组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表2 三组炎性因子表达情况比较(±s,pg/m L)
NK细胞亚群与炎性因子水平的相关性：血清TNF-α水平与外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、NK水平呈负相关关系(r=-0.348、-0.284、-0.291,P<0.05)，血清IL-10水平与外周血CD56 bright NK、CD56 dim NK、NK水平呈负相关关系(r=-0.458、-0.394、-0.429,P<0.05)，血清IL-6水平与外周血CD56 bright NK、CD56dim NK、NK水平呈负相关关系(r=-0.348、-0.293、-0.338,P<0.05)，血清IL-8与外周血CD56-CD16+NK水平呈正相关关系(r=0.254,P<0.05)。见表3。
表3 NK细胞亚群与炎性因子水平的相关性(r)
注：△P<0.05
讨论
艾滋病系人类免疫缺陷病毒感染所致，真菌感染是其常见的并发症之一。近几年，艾滋病合并真菌感染的发病率呈逐年升高趋势，对患者的生命健康造成严重威胁[6]。
CD56 bright NK、CD56 dim NK、CD56-CD16+NK、NK可参与调节身体的免疫功能，抑制病毒感染，故艾滋病合并真菌感染患者发病时NK细胞水平降低，身体免疫能力受损[7]。血清TNF-α、IL-10、IL-8、IL-6不仅可刺激并参与身体炎性反应，而且促进其他炎性因子水平升高，加快炎性反应进程，因此，其水平降低提示身体的炎性损伤减轻，病情好转[8]。本研究结果说明，在艾滋病合并真菌感染中，随着患者的病情进展，外周血NK细胞亚群水平降低，炎性因子水平升高。与陈皋等[9]研究结果相符。在艾滋病中，患者的免疫功能可发生损伤，使得细胞免疫相关指标水平降低，导致发生真菌感染的风险升高，而真菌感染可进一步刺激身体发生炎性损伤，从而加重患者病情[10,11]。本研究结果显示，血清TNF-α、IL-10、IL-6水平与外周血CD56 bright NK、CD56dim NK、NK水平呈负相关关系，血清IL-8与外周血CD56-CD16+NK水平呈正相关关系。表明艾滋病合并真菌感染患者NK细胞亚群与血清炎性因子水平存在显著的相关性，与柳丽娟等[12]研究结果相符。艾滋病者不仅外周循环NK细胞数量明显较低，亚群分布和功能也发生了改变，这主要体现为杀伤性NK细胞亚群减少，杀伤性NK细胞表面活化受体NKG2d表达增高而抑制受体NKG2A表达减少。作为天然免疫的重要组成部分，NK细胞在早期防御真菌感染方面起了重要的作用。缺乏功能性NK细胞的患者相对于NK细胞功能正常的患者更易于感染真菌。因此，艾滋病感染造成的NK细胞数量和功能损伤可能是艾滋病合并真菌感染的原因之一。真菌感染可能改变艾滋病患者的NK细胞亚群分布和功能，因此，分析艾滋病合并深部真菌感染患者NK细胞亚群有助于疾病的诊疗及对预后的判断。
综上所述，在艾滋病合并真菌感染患者中，随着病情进展，外周血NK细胞亚群水平降低，炎性因子水平升高，且NK细胞亚群与血清炎性因子水平存在显著的相关性。