吴洪涛?1,吴佳宁?2 ?
(1.辽宁省重大动物疫病应急中心 110000;2.沈阳市动物疫病预防控制中心 110000)
1 病禽的剖检?
外貌检查。检查天然孔:注意口、鼻、眼有无异常的分泌物,分泌物的量及性状;注意泄殖腔周围羽毛有无异常粪便附着,泄殖腔黏膜的变化及内容物的性状等。检查皮肤:注意头、冠、肉髯及身体其他部位的皮肤有无痘疹或结痂等,是否发生腐败;检查家禽的趾爪,注意有无赘生物、外伤、化脓、失水及胫骨有无变软等。检查各关节及龙骨:注意各关节有无肿胀、变形及长骨、龙骨有无变形、弯曲等表现。?
体腔检查。用消毒水将禽体羽毛浸湿,防止病原扩散及避免羽毛飞扬。用剪刀将股内侧连接腹侧的皮肤剪开,将两大腿向外和下方翻压,直至髋关节脱臼,使禽体以背卧位平放于瓷盆上。横向剪开腹部皮肤,使切口与上述股侧皮肤切口相连,握住游离皮肤,向前一直剥离到锁骨部,检查皮下组织和胸肌的状态。横向剪开腹肌、腹膜,并沿胸骨的两侧,向前将各肋骨、锁骨剪断,抓住龙骨的后端,用力向前向上翻拉,暴露整个体腔的器官。注意体腔有无积液,黏附渗出物及其他异常变化。将腺胃、肌胃、心、肝、脾、肺、肠、肾、卵巢、睾丸、法氏囊等各内脏器官先后从体腔摘出作细致检查,先观察外表形态、大小、色泽、质度等变化,再分别切开检查内部变化,注意有无炎性肿胀、充血、郁血、出血、溃疡、坏死等。?
颈部检查。将下颌骨、食道、嗉囊剪开,注意观察口腔和食道黏膜有无出血、溃疡、假膜或脓包等;同时剥离颈部皮肤检查胸腺有无出血、萎缩等变化;将小剪刀插入喉头,剪开气管和支气管,检查喉头和气管黏膜有无渗出、充血、出血或溃疡等。?
头部检查。眼部检查:主要观察眼的角膜有无异常变化及眼结膜有无出血或溃疡等。鼻窦部检查:沿额面经鼻孔剪开约1~3cm切口,将切口用手分开即可见鼻窦,观察其有无出血或渗出物的特性。脑部检查;用剪刀将头部皮肤剪开、以尖剪将整个额骨、颅顶骨剪除,暴露大脑和小脑,先观察脑膜血管的状态,脑膜下有无水肿和积液,然后再以钝器轻轻拨离,将前端嗅脑、脑下垂体及视神经交叉等部逐一剪断,将整个大脑和小脑摘出,观察脑实质的变化。?
神经检查。主要检查的神经为坐骨神经干。将股内侧的肌肉钝性分开即可见乳白色有横纹的坐骨神经干,观察神经干外膜有无水肿或出血及神经干的粗细是否均匀等。?
2 病料采取与病原菌(毒)分离?
家禽传染病的确诊,通常必须进行实验室诊断,采取病料与病原分离是实验室诊断的前提。病毒性病料、中毒性材料的采取一般应在急性感染期,选择典型的濒死病禽,病前不久用过疫苗或经抗病毒药物处理的禽只不宜采料。器械消毒,刀、剪、镊子等采料用具可干热灭菌或煮沸30min灭菌,注射器等器皿应干热灭菌或高压灭菌。病料采取的部位应根据不同疾病相应地采取其脏器或内容物。?
病毒性病料的采取与病毒分离:用灭菌剪刀及镊子剪取含毒量高的组织2~3g,投入灭菌瓶中,加盖,有条件的地方可即时将病料用灭菌乳钵研磨,并应用超声波或反复冻融法裂解细胞,加入5~10倍的灭菌生理盐水配成悬液,3000~8000?r/min?,离心15~20min,去除沉淀,在每毫升上清液中加入青霉素、链霉素各2000~4000IU,置4~8℃冰箱中感作2~4h。经无菌检验合格后,接种相应的生物学培养基作病毒分离培养,观察感染禽胚死亡及病变情况,收集胚液做进一步鉴定。?
细菌性病料中病原菌分离:对于各种细菌性疾病,应在病禽剖解前备好相应的培养基。对营养要求低的病原菌,如大肠杆菌可用普通琼脂;对营养要求较高的病原菌,如多杀性巴氏杆菌可用血液琼脂等;有特殊要求的病原菌,要使用特殊的培养基和方法进行培养;怀疑有杂菌污染的病料,应尽量使用需分离细菌的选择性培养基;病原含菌量少时应采用液体培养基,或用相应的增菌培养基增菌培养后,再进行分离培养;不确定病原菌的种类时,应同时使用多种培养基分离培养,以提高病原菌的分离成功率。?
血清学材料:一般都应采取双相血清,即在发病初期及后期各采取一份,进行检验,以检查有关抗体的变化情况。具体方法为采少量血清时,可用注射器沿向心端的方向从翅静脉直接采取血液;如需大量血清,则可从心脏采血。血液先放在经干热灭菌的小瓶或其他容器中自然凝固,待其自然析出血清,再将血清移至灭菌容器中冻结保存备用。血清若有溶血则会影响试验结果的准确性。