邱英莲 QIU Ying-lian
（茂名市食品药品检验所，茂名 525000）
摘要：建立一种准确快速测定食品中苏丹红Ⅰ-Ⅳ的高效液相色谱分析方法。通过改变提取溶剂，简化样品处理，改变标准物质的溶剂，用二极管阵列检测器进行测定。结果4种苏丹红标准曲线的回归系数均在0.999以上，加标回收率在85.5%-99.2%之间，最低检测限均为10ug/kg。结果表明用本方法测定食品中的苏丹红Ⅰ-Ⅳ的含量，具有快速、灵敏、稳定性好的特点。
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关键词 ：高效液相色谱；食品；苏丹红
中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2015）23-0164-02
作者简介：邱英莲（1972-），女，广东茂名人，毕业于中南林学院，研究方向为食品检测。
0 引言
苏丹红属偶氮系列化工合成染料，一般不溶于水，易溶于有机溶剂，被广泛应用于化学、生物等领域，用于汽油、机油、润滑油、鞋油等化工产品的染色。有关研究表明，苏丹红具有突变性和致癌性，可以使兔子和老鼠患癌症，对人类肝细胞也显现出致癌的特性，我国以及欧盟多数国家不允许将苏丹红用于食品加工。由于苏丹红对食品也具有染色功能，且比天然色素价格低廉及染色牢固，导致一些食品厂商受利益驱使仍违禁使用。国家标准的高效液相色谱法经过改进后简化了操作过程，并可满足绝大多数样品的定性定量检测，能在大多数检验机构中推广应用。
1 实验部分
1.1 仪器和试剂
岛津LC-10A高效液相色谱仪，SPD-M10AvP二极管阵列检测器，LC-solution色谱工作站，超声波清洗器，漩涡混合器，苏丹红标准物质（德国，4种标准物质的标准值：苏丹红Ⅰ：99％；苏丹红Ⅱ：99％；苏丹红Ⅲ：98％；苏丹红Ⅳ：99％），乙腈（HPLC级），原子级水。
1.2 色谱条件
色谱柱：phenomenex C18柱（150mm*4.6mm，5um）；检测器：二极管阵列检测器
流动相：
溶剂A 0.1％甲酸的水溶液：乙腈＝85：15
溶剂B 0.1％甲酸的乙腈溶液：丙酮＝80：20
剃度洗脱：流速：1ml/min；检测波长：苏丹红Ⅰ 478nm；苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ 520nm ；于苏丹红Ⅰ出峰后切换；柱温：30℃；进样量10ul。
剃度条件如表1。
1.3 实验方法
准确称取5.000g咸蛋或者辣椒粉试样置于150ml具塞锥形瓶中，加入50ml乙腈，在漩涡混合器上充分混合5分钟，超声波处理1小时，静置，滤纸过滤，再用0.45um微孔滤膜过滤，滤液待测。
2 结果与分析
2.1 线性关系
分别准确称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ各0.0107g，0.0123g，0.0091g，0.0119g（标准物质含的量不同），用丙酮溶解并定容至100ml，该4种苏丹红的标准储备液的浓度分别为106ug/ml，122ug/ml，89ug/ml，118ug/ml（按实际含量折算）。
再分别吸取标准储备液0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ml，用乙腈定容至50ml，在以上色谱条件下进行标准曲线的测定，4种苏丹红的回归方程和相关系数见表2。
2.2 溶剂对苏丹红测定结果的影响
按国家标准检测方法配制标准溶液时，用乙醚溶解后，用正己烷定容，并用正己烷稀释配制标准溶液使用液进行测定。如果苏丹红混合标准系列溶液不经过氧化铝层析柱处理，直接进样测定时，苏丹红Ⅰ出峰的峰形良好，但是苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ出峰的峰形较差（见色谱图1），标准曲线的线性非常差。
然而，用丙酮、乙腈作为溶剂配制标准溶液时，在丙酮中溶解并定容，用乙腈稀释，并配制系列混合标准溶液进行测定。苏丹红混合标准溶液不经过氧化铝层析柱处理，直接进样测定时，苏丹红（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）出峰的峰形非常好，标准曲线的线性也很好。见色谱图2。
2.3 样品测定及回收率
按以上实验方法处理样品，随机对市售的4个咸鸭蛋样品进行测定，检测结果均为未检出，其分析谱图如色谱图3。对苏丹红Ⅰ-Ⅳ组分进行加标回收实验，测得结果见表3，其回收率在85.5%-99.2%之间。通过对样品进行加标回收实验，由表3结果可以看出用此方法检测食品中的苏丹红Ⅰ-Ⅳ的含量是准确可靠的。
3 结论
本文方法与国家标准相比：改变了样品被测组分的提取溶剂，极大地简化了样品处理，大大缩短了检验时间；改变了配制标准溶液的溶剂，改善了标准物质出峰的峰型和线性关系；改变了液相色谱检测器，利用二极管阵列检测器特有的程序可变波长功能来测定，选择苏丹红各组分最大吸收波长为检测波长，有效地克服了基线漂移，减少了共存物的干扰，提高了实验的灵敏度和检测的稳定性。
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参考文献：
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[2]NY/T 1258-2007，饲料中苏丹红染料的测定 高效液相色谱法[S].
[3]张志健 吕伟军 HPLC法测定辣椒精油中苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ[J].现代农业科技，2012（17）.
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