建海a，b，张俊芳c
（宁夏师范学院，a.六盘山资源工程技术研究中心；b.化学与化学工程学院；c.物理与信息技术学院，宁夏 固原 ７５６０００）
摘要：研究扁蓄（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ａｖｉｃｕｌａｒｅ Ｌ．）乙醇提取物对小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ Ｌ．）触杀、胃毒、拒食及抑制生长的影响，比较扁蓄不同部位的活性，并对提取溶剂进行选择。结果表明，扁蓄乙醇提取物对小菜蛾的主要作用方式为触杀。
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关键词 ：扁蓄（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ａｖｉｃｕｌａｒｅ Ｌ．）；小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ Ｌ．）；生物活性
中图分类号：Ｓ４８２．１ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）07－1593-03
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.07.015
扁蓄（Ｐｏｌｙｇｏｎｕｍ ａｖｉｃｕｌａｒｅ Ｌ．）又名扁竹、竹节草、乌蓼等，为蓼科一年生或多年生草本植物［１］。中国大部分地区都产扁蓄，以河南、四川、浙江、山东、吉林、河北等地产量较大，欧、亚、美三洲北温带的国家也有分布［２］。扁蓄具有利尿、降压、利胆、保肝和抗菌等功效。以枸杞蚜虫、小菜蛾为试虫，测试了扁蓄的杀虫活性，研究表明其具有较高的活性［３，４］。因此，本试验以扁蓄提取物对小菜蛾的生物活性进行了系统研究，旨在为扁蓄活性成分的分离提供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料
１．１．１ 供试植物 扁蓄采自宁夏六盘山区，采集时间为夏季。将采集的扁蓄阴干，用植物粉碎机磨碎，过４０目筛，制得干粉。
１．１．２ 供试昆虫 小菜蛾（Ｐｌｕｔｅｌｌａ ｘｙｌｏｓｔｅｌｌａ Ｌ．）采自宁夏大学试验田，羽化后的成虫喂食蜜糖水，产卵材料为盆栽油菜苗，幼虫用油菜苗饲喂，选择健康的３龄幼虫供试（养虫室温度１８～２３ ℃，相对湿度７５％～８０％，光照Ｌ∶Ｄ＝１２∶１２）。
１．２ 提取方法
准确称取植物干粉５０．０0 ｇ，放入１ ０００ ｍＬ的锥形瓶中，加入１０倍量的溶剂，浸泡２４ ｈ，超声波处理３０ ｍｉｎ，抽滤，将抽滤液用旋转蒸发仪浓缩得浸膏。
１．３ 生物活性测定
１．３．１ 触杀活性测试 挑选健康、大小一致的小菜蛾3龄幼虫，放入用纱网制成的圆柱形容器，在供试药液中浸泡１０ ｓ，迅速取出，并用干净的吸水纸吸去多余药液，然后将浸药试虫转入垫有保湿滤纸的培养皿中，饲喂新鲜甘蓝叶片。分别在处理后２４、４８、７２ ｈ记录幼虫的死亡情况。每组处理设１０头幼虫，设６次重复。计算死亡率及校正死亡率［５，６］。
１．３．２ 胃毒活性测试 采用载毒叶片法测试药液对小菜蛾的胃毒活性［７］。将试虫置于直径６ ｃｍ的培养皿中，每皿１条幼虫，停止进食８ ｈ后，夹取约１ ｃｍ２的新鲜甘蓝叶片于供试药液中浸渍３ ｓ，取出待丙酮挥干后放入培养皿中饲喂。每个处理组设１０头试虫，设６次重复，在处理后２４、４８、７２ ｈ后检查中毒及死亡情况。计算其死亡率及校正死亡率。
１．３．３ 拒食活性测定 非选择性拒食作用测定采用叶碟法［８］。将新鲜甘蓝叶片用圆形打孔器（直径１．６ ｃｍ）打成叶碟，放入到供试药液内浸３ ｓ，取出晾干后放入垫有滤纸（去离子水保湿）的培养皿（直径６ ｃｍ）中，每个培养皿中放入１片处理过的叶碟，接入己停止进食１２ ｈ的3龄小菜蛾。每处理设１０个重复， ２４ ｈ和４８ ｈ后用坐标纸测量取食叶面积，计算平均取食面积和拒食率。拒食率＝（对照平均每头取食量－处理平均每头取食量）／（对照平均每头取食量）×１００％。
１．３．４ 生长发育抑制作用 将直径３ ｃｍ的甘蓝叶在０．０５ ｇ／ｍＬ供试药液浸渍３ ｓ，取出晾干后放入垫有滤纸（去离子水保湿）的培养皿（直径６ ｃｍ）中，然后接入已称重的小菜蛾３龄幼虫１头，置于２５ ℃，光照１２Ｌ∶１２Ｄ培养箱中培养，用５０％丙酮作对照，设５次重复，分别在取食２４ ｈ和４８ ｈ后称量小菜蛾幼虫的体重，计算生长发育抑制率，然后换新鲜无毒的甘蓝叶饲养，一直至化蛹，记录蛹重和化蛹率［９，１０］。生长发育抑制率＝（对照组体重增加量－处理组体重增加量）／对照组体重增加量×１００％。
２ 结果与分析
２．１ 触杀作用
扁蓄乙醇提取物对小菜蛾３龄幼虫具有一定的触杀活性（表１），并且作用迅速，在供试药液浓度为０．０５ ｇ／ｍＬ时，７２ ｈ校正死亡率为９０．０％，室内毒力测定结果表明其对小菜蛾的ＬＣ５０为０．０１１ ８０ ｇ／ｍＬ。
２．２ 胃毒作用
扁蓄乙醇提取物对小菜蛾３龄幼虫有一定的胃毒活性（表２），在供试液浓度为０．０５ ｇ／ｍＬ时，７２ ｈ的校正死亡率仅为３３．３％，胃毒作用较弱。
２．３ 拒食作用
扁蓄乙醇提取物对小菜蛾２龄幼虫的拒食活性不明显（表３），在供试药液浓度为０．０５ ｇ／ｍＬ时，２４ ｈ和４８ ｈ的拒食率分别为０．２３％和－１７．５８％。
２．４ 生长发育抑制作用
扁蓄乙醇提取物对小菜蛾２龄幼虫在２４ ｈ内无生长发育抑制作用（表４），但在４８ ｈ内表现出了一定的抑制作用，抑制率为４４．６８％；化蛹率为８１．３１％（ＣＫ为８６．４３％），羽化率为８９．２８％（ＣＫ为９４．８６％）。
２．５ 不同部位活性比较
扁蓄不同部位对３龄小菜蛾活性存在差异（表５），活性由高到低依次为叶、全草、根、茎。浓度为０．０３ ｇ／ｍＬ时，７２ ｈ校正死亡率分别为７５．０％、７３．３％、７０．０％和４０．０％。说明活性物质主要分布在根和叶中。
２．６ 提取溶剂选择
准确称取ｌ０．００ ｇ扁蓄干粉６份，分别用１０倍的正己烷、石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、乙醇、水浸泡２４ ｈ，超声提取３０ ｍｉｎ，提取３次，提取率分别为１．１７％、１．２０％、２．３０％、５．７１％、６．７７％、１３．４９％。６种溶剂的提取率从大到小为水、乙醇、三氯甲烷、乙酸乙酯、石油醚、正己烷（表６）。杀虫活性测定结果见表７，在６种不同提取溶剂中，扁蓄乙醇提取物的生物活性最高，综合考虑提取率和活性，选择乙醇为提取溶剂。
３ 小结与讨论
扁蓄乙醇提取物对小菜蛾的作用方式主要表现为触杀作用，虫体接触供试药液后，先是经历短时间剧烈摆动，然后虫体瘫痪、麻痹，部分虫体不能恢复，直接死亡。死亡状态虫体成“Ｃ”形或“Ｖ”形；部分虫体虽经历一段时间后还可以恢复，但取食量明显减少或不吃直至死亡。说明药物可能是通过试虫表皮渗入体内发挥作用。扁蓄的各部位（根、茎、叶以及全草）乙醇提取物的生物活性测定结果表明，对小菜蛾活性最强的为扁蓄叶的提取物，但与其全草比较，活性相差不大，而全草量大，易采易得。因此综合考虑，选用其全草为原料。在６种不同提取溶剂中，扁蓄的乙醇提取物的生物活性最高，综合考虑提取率和活性，选择乙醇为提取溶剂。
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参考文献：
［１］ 中国科学院中国植物志编辑委员会．中国植物志［Ｍ］．北京：科学出版社，１９９８．
［２］ 李景华，万玉梅，刘玉芹．扁蓄种群生命表的研究［Ｊ］．吉林医药学院学报，２００５，２６（３）：１３７－１３９．
［３］ 丁建海，杨敏丽．扁蓄乙醇提取物杀虫活性初探［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５（３５）：１１４９７－１１４９８．
［４］ 丁建海，杨敏丽．扁蓄对小菜蛾杀虫活性物质初选［Ｊ］．安徽农业科学，２００７，３５（３５）：１１８９０－１１８９３．
［５］ 谢红英，蒋红云，王国平，等．石菖蒲根茎提取物对粘虫的生物活性［Ｊ］．农药，２００４，４３（８）：３６７－３６９．
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［１０］ 秦小萍，赵红艳，杨美林．坡柳种子提取物对菜青虫取食和生长发育的影响［Ｊ］．农药，２００７，４６（７）：４９４－４９６．