李守江1，韩猛立2，胡 鹏1，刘长彬2，张 宾2，李国庆2，夏茂飞1，马宝琳1，王智鹏1
（1.兵团第十师一八八团，新疆 阿勒泰 836000；2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所）
摘要：2014年初春，新疆北屯市周边团场羊场爆发了以腹泻为主要症状的疾病，经过临床观察、实验室检测和药敏试验等实验，确定主要致病菌为大肠杆菌，经敏感药物治疗获得了良好的效果。为防控类似疾病提供了借鉴与参考依据。
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关键词 ：羔羊腹泻；病原分离鉴定；综合防治
2014年3～4月，新疆北屯市出现3～4次大风，气温剧变；周边团场部分羊场暴发了以腹泻为主要症状的疾病，导致大批羔羊死亡。经临床症状、剖检变化、实验室病原分离鉴定，确诊为致病性大肠杆菌性引起的羔羊腹泻病。通过选择敏感药物对发病羔羊进行治疗，在短时间内控制了病情，并取得了良好的治疗效果。
1 发病情况
北屯周边某团场的3个养殖场，养殖基础母羊均在1000只以上，春季产羔4000余只，羔羊出生后1周陆续出现腹泻症状，发病情况见表1，且发病的羊只主要集中在小尾寒羊与当地的阿勒泰大尾羊、肉用萨福克羊、多胎萨福克羊、肉用美利奴羊等的杂交后代上，本地阿勒泰大尾羊的自交后代发病情况较轻。驻场兽医用青霉素、链霉素、林可霉素等药物治疗，但效果不理想。
2 临床症状及剖检变化
2.1 临床症状
病羊精神萎顿，低头拱背，不吃奶，持续性腹泻，开始是糊状，后逐渐转变为水样腹泻，粪便颜色先呈黄绿色，后带有黑色黏液，并含有气泡，味恶臭。肛门失禁，脱水。倒地，头向后仰，四肢呈游泳状，口流白沫，呼吸急促，在数小时内死亡。病初体温40℃，不久即下降，体温随后下降或降至正常。
2.2 剖检变化
剖检病死羔羊6只，肉眼可见体表无明显病变，尸体呈不同程度脱水；胃肠道鼓气明显，内含有大量没有消化的凝乳块，部分肠道有出血现象；肺脏间质增宽，清晰，严重者与胸腔粘连，偶见有白色脓性分泌物；胸腔及心包积液明显；肾脏质地较软，表面偶见出血点。
3 实验室检验
3.1 镜检
取病死羔羊的心血、心包液、肺脏、肝脏、脾脏和肾脏进行涂片，革兰氏染色及美蓝染色，镜检，在肝脏中明显可见革兰氏阳性粗大杆菌，呈链状排列，并有荚膜。此外，在其他脏器可见革兰氏阴性短杆菌。
3.2 细菌的分离培养
不同脏器病原菌分离培养结果：（1）心包液：革兰氏阳性球菌，链状排列。（２）胸腔液：革兰氏阴性短杆菌。（３）肝脏：革兰氏阳性杆菌，厌氧，可形成荚膜，在血平板上产生β溶血；革兰氏阴性短杆菌，不溶血。（4）肺脏：革兰氏阴性短杆菌，两级浓染。（5）肾脏：革兰氏阴性短杆菌，不溶血。
3.3 致病力试验
将以上分离所得细菌以及肝脏、肺脏组织研碎注射给小白鼠[１]。结果除肾脏分离株及心包液分离株外，其余菌株及患羊组织均可至死小白鼠。
从死亡小白鼠的肝脏分离到革兰氏阳性单个或呈短链状排列的较大杆菌，有荚膜，将其编号为BT001；革兰氏阴性单个散在短杆菌，两极浓染，将其编号为BT002；革兰氏阴性单个散在短杆菌，将其编号为BT003；革兰氏阴性单个散在短杆菌，将其编号为BT004。
3.4 细菌的鉴定
3.4.1 细菌的生长表现
将以上分离菌株接种至EMB、BHI、MAC、血液琼脂平板上，其生长表现为BT001在血平板上产生β溶血，菌落较大（＞2.0mm），多见几个菌落融合在一起；在BHI平板上生长较差。BT002在血平板上不溶血，在BHI平板上可形成直径约2.0mm、圆形、表面光滑、干燥、边缘整齐、白色、不透明的菌落；在MAC琼脂平板上不生长。BT003在血平板上不溶血，在BHI平板上可形成直径1.5～2.0mm、圆形、隆起、边缘整齐、灰白色、不透明菌落；在MAC琼脂平板上呈红色菌落；在EMB琼脂平板上的菌落为黑色，并带有金属光泽。BT004在血平板上不溶血，在BHI平板上可形成直径1.0～2.0mm、圆形隆起、边缘整齐、白色、湿润的菌落；在MAC琼脂平板上呈红色菌落；在EMB琼脂平板上的菌落为黑色，并带有金属光泽。
3.4.2 细菌生化试验结果
将以上4株有毒力的细菌做生化鉴定[２]（细菌生化微量管购自杭州天和微生物试剂有限公司），结果见表2。
3.5 药敏试验
将BT001~BT004作为目标菌，采用纸片扩散法做药敏试验[３]（细菌药敏纸片购自杭州天和微生物试剂有限公司），结果见表3。
综合以上试验结果，可以判定BT001为梭菌属的细菌，BT002为巴氏杆菌，BT003与BT004为致病性大肠杆菌。说明此次引起羔羊腹泻的主要致病菌是大肠杆菌。
4讨论
（1）此次羔羊腹泻的发生多集中于杂交后代羔羊，且前期出现大风降温等异常天气。杂交羊虽然具有产羔数多、生长快等优点，但是没有当地羊对环境变化的耐受性强，一但外界环境发生异常变化，可引起羔羊发生应激反应，并表现出不同程度的疾病状态[4]。（2）此次腹泻的主要病原菌为致病性大肠杆菌。随着羔羊腹泻的发生，机体抵抗能力逐渐下降，引起梭菌属细菌、巴氏杆菌等继发感染，最终导致羔羊发生败血症引起死亡。（3）对该病的治疗，可参照药敏结果（即菌必治、左氟沙星、硫酸卡那霉素、头孢噻呋较为敏感）进行，也可将以上4种分离菌株制成四联灭活疫苗，进行预防性注射。
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参考文献
[1]陆承平.兽医微生物学.第四版[M].北京：中国农业出版社，2007.
[2]陈溥言.兽医传染病学.第五版[M].北京：中国农业出版社，2006.
[3]姚火春.兽医微生物学实验指导.第二版[M].北京：中国农业出版社，2007.
[4]贺晓龙，金珑.波尔羔羊腹泻的病原分离鉴定及综合性防治[J].黑龙江畜牧兽医，2006（８）：84-85.