闫冬梅/ 北京市大兴区动物疾病控制中心
(一)发病情况
2014 年8 月,北京大兴区某养鸡户所养2 000 多只35 日龄肉鸡发病,临床主要表现为病鸡精神不振,闭目呆立,不愿走动,两翅下垂呈昏睡状态,羽毛蓬松无光,食欲废绝,部分鸡排除灰白色或黄绿色稀粪,腹部和大腿内侧皮浮肿且触之有波动感,皮下积水呈深茶色。有的鸡只胸腹部羽毛脱落,皮肤呈紫红色或紫黑色浮肿,局部发炎,肿胀,甚至破溃,破溃后流出褐色液体,局部污秽不洁形成紫黑色结痂。发病的26 只(约1%)鸡呈急性败血症型经过,2 ~ 3 d 内死亡,200 多只(约10%)的鸡表现为慢性关节炎,表现关节肿大,趾底发生肿胀呈紫黑色,有的病例眼睑肿胀,闭眼,有脓性分泌物,结膜红肿,严重者出现单侧失明。户主用青霉素治疗3 d 没有明显效果来诊断中心求治。
(二)病理剖检
病、死鸡患处皮肤湿润、肿胀、溃烂,胸部皮下出血,呈弥漫性紫红色或紫黑色,有大量胶胨样粉红色水肿液,胸与大腿内侧有散在出血斑或出血条纹;切开趾地肿胀部位,内含血样浆液或干酪样物;心冠脂肪和心外膜有出血点,心包有黄红色半透明积液;脾脏肿大;肝脏肿大瘀血,病程较长的鸡肝脏上有白色坏死点;脾脏肿大有坏死点;关节滑膜增厚、充血、关节囊充满纤维素性渗出物。
(三)实验结果
通过一系列实验检测,结果可见:
1. 触片镜检。可见到病原菌为蓝色,革兰氏阳性排列不规则,呈单个或成双排列的球菌。
2. 分离培养。24 h 后在普通琼脂平板上长出圆形、光滑、湿润、中央隆起、边缘整齐、微黄色不透明的小菌落,直径1 ~ 2 mm ;在室温下放置48 h 后,菌落变成黄色。麦康凯培养基上没有细菌生长。在血琼脂平板上形成较大的白色菌落,菌落周围有透明的溶血环。取培养物涂片,经革兰氏染色镜检,可见大量形态大小不一致的革兰氏阳性、呈葡萄串状排列的小球菌。
3. 肉汤培养。培养24 h 后肉汤呈均匀一致浑浊,管底有少量沉淀,轻轻震荡,沉淀物上升,悬即消失。培养48 h 后,液面上形成一层很薄的菌膜,在管底则形成多量粘稠的沉淀,微黄色不透明,震荡不消失。4. 生化试验结果(见表1)
由表1 可看出此菌可使五种糖全部发酵变黄,但不产气;产生过氧化氢酶;缺氧条件下产酸;可液化明胶;靛基质试验阴性;甲基红试验阴性。符合葡萄球菌的生化特性,结合发病情况及剖检变化可确诊为肉仔鸡葡萄球菌病。
(四)治疗
1. 药敏试验。取链霉素(STR)、青霉素(PG)、氨苄青霉素(AMP)、卡那霉素(KNA)、磺胺甲基异恶唑(SMZ)、苯唑青霉素(PL2)、红霉素(ERY)、头孢唑啉(CFZ)8 种抗菌素的药敏纸片做药敏试验:将分离的葡萄球菌的一个菌落接种于普通肉汤培养基,置37℃温箱中培养24h 后摇匀,用灭菌的棉拭子蘸取肉汤培养物,均匀的涂到普通琼脂平板上,置室温干燥3 ~ 5 min 后用灭菌的镊子将药敏纸片贴于平板表面,每板贴5 个,置37℃温箱中培养24 h 后观察结果。此株葡萄球菌对红霉素(ERY)、头孢唑啉(CFZ)等表现高度敏感,而对青霉素(PG)、磺胺甲基异恶唑(SMZ)、链霉素(STR)、氨卞青霉素(AMP)等不敏感(表2)。
2. 治疗结果。选用红霉素按1∶1 500 拌料,连用5 d,局部炎症用3% 的龙胆紫溶液治疗。鸡舍和鸡群用0.3% 的过氧乙酸带鸡消毒,连用3 d。同时加强饲养管理全群饮服复合维生素和矿物质以增强鸡的抵抗力,提高营养物质的摄入,消除不良应激因素。鸡群第三天停止死亡,疫情得到有效控制。
(五)讨论
1. 该株葡萄球菌的致病性性和发病原因。该株葡萄球菌溶血试验阳性,过氧化氢酶阳性,能分解甘露醇,色素为金黄色,说明其具有致病性。
此次发病可能与户主的饲养管理不当有关,该养鸡场鸡舍通风不良,温度过高,且鸡笼有多处坏损部位外露尖刺,造成鸡趾部、胸腹部损伤,舍内葡萄球菌可能是经伤口或消化道感染鸡只而发病;另外,发病初期养鸡户盲目使用抗生素,未能使病情得到及时控制,造成该病暴发。
肉鸡葡萄球菌病的发生常与诱发因素有关。①周围环境严重污染时导致葡萄球菌数量大量增加, 超过禽体的抵抗力。②皮肤、黏膜受机械性损伤后易感, 如网上育雏时,网片陈旧, 铁丝脱焊, 有“毛刺”时易损伤鸡的皮肤。③饲料或垫料中霉菌毒素的存在。④腐蚀性的化学药品对皮肤的作用。⑤鸡患其他疾病, 如禽痘等损伤皮肤或降低了机体的抵抗力。⑥鸡群过大, 拥挤,通风不良。⑦蚊虫叮咬。⑧鸡只营养缺乏,啄癖。相似病例近年均有报道,主要病因都是由地面尖锐物刺伤皮肤引起。
2. 鸡葡萄球菌病的主要病原是金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌是畜禽皮肤上的常在菌,可条件性致病,当鸡受到外伤或应激后,便乘虚而入鸡的体内,故有学者认为金黄色葡萄球菌的感染即是由体表到体内的再定居过程。鸡葡萄球菌病多发生于规模化养鸡场,尤其侵害30 ~ 60 日龄的笼养肉鸡,主要表现为皮炎型、关节炎型、趾底肿瘤型和翅坏疽四大类型,也有其他类型如眼型、肺炎型、肝炎型等,但较少见。金黄色葡萄球菌常引起雏鸡败血症,青年鸡关节炎,成年鸡为慢性局灶性病变。其中在213例细菌病中葡萄球菌病为61 例, 占28.6%, 其中以关节炎为主的22 例,占该病的34.8%。目前, 关于鸡葡萄球菌病的临床症状、病理组织学以及细菌在体内的动态变化, 鸡和火鸡的葡萄球菌性关节炎病理模型中外周异嗜性细胞数变化, 吸附性、趋化性、吞噬功能及杀菌能力的研究在国内外已有报道。
在无芽孢菌中,葡萄球菌的抵抗力较强,在干燥的脓汁或血液中可存活2 ~ 3 个月,80℃下30 min才能将其灭活,3% ~ 5% 石碳酸3 ~ 15 min 既可致死,70% 乙醇中数分钟后, 即可死亡。1 ∶ 20 000的洗必泰、消毒净、新洁而灭可在5 min 内杀死本菌。
葡萄球菌对磺胺类、青霉素类、金霉素类、新霉素类等抗生素敏感,但易产生耐药性。某些菌株能产生青霉素酶或携带抗四环素、红霉素等基因,其中红霉素防治鸡葡萄球菌感染具有较好疗效,在临床上广泛应用于治疗鸡葡萄球菌等由于革兰氏阳性菌引起的感染。因而此类菌对这些抗生素产生耐药性,在治疗葡萄球菌病时依据药敏试验选择对其敏感的药物。
3. 预防措施。葡萄球菌是条件性致病菌,改善对鸡群的饲养管理,就能预防本病的发生。
(1)减少外伤。创伤是葡萄球菌进入机体的一个门户,因此,减少受伤机会可预防感染,尽量避免和消除家禽饲养环境中可刺破爪和其他部位的皮肤的尖利碎片,保证垫料的质量,减少爪垫的溃疡。鸡群密度不能过大,防止过分拥挤造成外伤。
(2)注意卫生条件,防止疾病传播。及时清除粪便,加强通风换气,保持舍内空气新鲜,改善卫生条件,深埋或焚烧病鸡,粪便堆积发酵,做到无害化处理。注意孵化室的管理卫生,防止工作人员感染葡萄球菌,引起雏鸡感染和发病,甚至散播疫病,种蛋及孵化室要严格消毒。
(3)加强消毒工作。0.2% ~ 0.3%的过氧乙酸或0.2% 的百毒杀带鸡喷雾消毒,每天一次,可减少环境中的含菌量、减少感染机会。饲养育雏用具、饮水器、饲料槽等用吉安威灭消毒液400 倍稀释后浸泡消毒。断喙、免疫时做好局部消毒。
(4)加强饲养管理。给予全价饲料,防止蛋白质和矿物质缺乏,补充维生素和微量元素,密度、光照适当,适时断喙,以防啄伤,使鸡具有较强的抗病能力。饮水中加电解多维也提高机体的抗病能力。
(5)药物预防。在易发病日龄和季节间断往饲料中加0.1% 的麦迪霉素等;鸡群土霉素按0.2% 的比例加入饲料中饲喂,连用3 ~ 5 d 可预防;采用水溶性北里霉素500×10-6饮水,连用5d。中草药预防采用自拟金葡散或金葡汤: 知母35 g, 栀子35 g, 杭菊花35 g, 黄柏40 g, 茵陈蒿35 g, 秦皮35 g, 金银花40 g, 大青叶40 g, 芦根40 g, 苦参40 g, 共十味中草药, 其中黄柏、茵陈蒿、金银花、大青叶、苦参五种中草药对G+ 球菌如金黄色葡萄球菌、链球菌及部分大肠杆菌、痢疾杆菌均有良好的抑制作用。
(6)疫苗预防。预防早期传染性法氏囊病病毒的感染,有助于防止鸡葡萄球菌病的发生,为了控制该病的发生和蔓延可用葡萄球菌多价油苗给雏鸡注射。用葡萄球菌油剂多价灭火苗0.5 ml 于15 ~ 24 日龄皮下注射,14 d 产生免疫力,免疫期约6个月,保护率达90%。
参考文献(略)