王占明/ 北戴河区动物卫生监督所
（一）规范操作PPD 皮内变态反应试验
1. 注射部位及术前处理。在颈侧中部上1/3 处剪毛（或提前一天剃毛），3 个月以内的犊牛，也可在肩胛部进行，直径约10 cm。用卡尺测量术部中央皮皱厚度，作好记录。注意术部应无明显的病变。
2. 注射剂量。将牛型结核分枝杆菌PPD 稀释成每毫升含2 万IU 后，皮内注射0.1 ml。
3 .注射方法。先以7 5％ 酒精消毒术部，根据皮厚不同，在25 ～ 140度之间入针，注意消毒不宜用碘酊等刺激性较强的消毒剂。然后皮内注射定量的牛型结核分枝杆菌PPD，注射后局部应出现小疱，如对注射有疑问时，应另选1 5 cm以外的部位或对侧重作。
4. 结果判定。皮内注射后经72 h 判定，仔细观察局部有无热痛、肿胀等炎性反应，并以卡尺测量皮皱厚度，作好详细记录。对阴性牛和疑似反应牛，于注射后96 h 和120 h 再分别观察一次，以防个别牛出现较晚的迟发型变态反应。注意同一个体在注射结核菌素前和注射后72 h 判定时应由同一人使用同一卡尺测量皮厚，每次测量捏起皮皱的方向应该一致，尽量防止出现测量误差。
（1）阳性反应：局部有明显的炎性反应，皮厚差大于或等于4.0 mm。
（2）疑似反应：局部炎性反应不明显，皮厚差大于或等于2.0 mm小于4.0 mm。
（ 3 ）阴性反应：无炎性反应。皮厚差在2.0 mm 以下。
（二）定期监测建立牛结核病净化群
1. 污染牛群的监测与处理。被确诊为结核病牛的牛群（场）为牛结核病污染群（场），应用牛型结核分枝杆菌PPD 皮内变态反应试验对该牛群进行反复监测，每次间隔3个月，发现阳性牛及时扑杀。扑杀的病畜，要按照GB16548-1996《畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程》进行无害化处理。
2 .新生犊牛的监测。犊牛应于2 0日龄时进行第一次监测，100 ～ 120 日龄时，进行第二次监测。凡连续两次以上监测结果均为阴性者，可认为是牛结核病净化群。
3 .疑似反应牛的复检。凡牛型结核分枝杆菌PPD 皮内变态反应试验疑似反应者，于42 d 后进行复检，复检结果为阳性，则按阳性牛处理; 若仍呈疑似反应则间隔42 d再复检一次，结果仍为可疑反应者，视同阳性牛处理。
（三）隔离
疑似结核病牛或牛型结核分枝杆菌PPD 皮内变态反应试验可疑阳性反应牛须隔离复检。复检结果为阴性的，应继续隔离饲养2 ～ 13 个月，至下一次监测为阴性的才能取消隔离与健康牛混群饲养。
（四）消毒
检出并剔出结核病牛后，对病畜和阳性畜污染的场所、用具、物品进行严格消毒。金属设施、设备可采取火焰、熏蒸等方式消毒；圈舍、场地、车辆等，可选用2% 烧碱等有效消毒药消毒；受污染的饲料、垫料可采取深埋发酵处理或焚烧处理；粪便采取堆积密封发酵方式，以及其它相应的有效消毒方式。牛舍内的一切用具应定期消毒; 产房每周进行一次大消毒，分娩室在临产牛生产前及分娩后各进行一次消毒。
（五）防止并发或继发结核病
其他疾病也可以促进结核病的发生。结核病特别常继急性肺炎之后而发生，患肺炎的病肺组织、尤其是没有完全被吸收的渗出物乃是结核杆苗特别优良的培养基。此外，机体还可以被急性全身性传染病所削弱，从而使隐性结核病激发或使其进程加快。因此污染牛群的个体发生呼吸道感染时要及时治疗。
（六）加强饲养管理提高奶牛
群体抗病能力 按年龄、体况以及不同生产阶段进行分群饲养，群体不宜过大，可按每栋5 0 ～ 1 1 00 头的规模组群。牛床按1 1 0% 的比例配备，牛床面积要适合泌乳牛、围产期牛、青年母牛和犊牛的生长需要。成年乳牛的运动场面积应为每头25 ～ 30 ；青年牛的运动场面积应为每头20 ～ 25 ；育成牛的运动场面积应为每头15 ～ 20 ；犊牛的运动场面积应为每头8 ～ 10。