刘晓慧1 李福平2 张焕灵1
1.蛇口人民医院产科，广东深圳 518067；2.深圳市妇幼保健院内科，广东深圳 518028
[摘要] 目的 探索基因TCF7L2rs11196218与中国汉族妇女妊娠期糖尿病(GDM)的关系。方法 依据美国糖尿病学会2004年颁布的GDM标准进行诊断,将2009年6月—2012年6月收取的289例患者排除糖耐量异常以及I型糖尿病、胰腺炎及胰腺手术者，随机分为对照组145例，病例组144例。且经rs11196218的单核苷酸多态性（SNPs），对等位基因在二组间频率分布进行统计学处理。结果 发现两组之间对照组剖腹产69（47.9%），非剖腹产75（52.1%），病例组剖腹产94（66.7%），非剖腹产47（33.3%），病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义。且两组间rs11196218位点基因的基因频率AA、GG、GA，对照组分别为5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例组分别为9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差异不明显，无统计学意义。而两组间等位基因A及G分布频率分别为对照组31.5（21.9%）、112.5(78.1%)，病例组38(26.4%)、106(73.6%)，差异无显著统计学意义。结论 未发现rs11196218与中国汉人GDM发病相关联。高龄和双胎妊娠是中国汉人妇女GDM的发病因素，合并GDM患者剖腹产率升高。
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关键词 ] 妊娠期糖尿病；单核苷酸多态性；rs11196218
[中图分类号] R473.74 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）12（c）-0007-03
妊娠期糖尿病（GDM）在全球发病率逐步升高。国内外的研究表明GDM与2型糖尿病（T2DM）有相似发病机理。转录因子7类似物2（Transcription factor 7 like2,TCF7L2）基因位于人类10号染色体q25.3区,其rs7903146多态性是至今人类发现与T2DM相关性最显著的。但Ng[1]等人发现rs7903146点位在香港汉族人群中突变率很低。以往研究表明，很多单核苷酸多态性（SNPs）是外国人种某些疾病的遗传基础，但在中国汉人中研究结果不同。TCF7L2的另一点位rs11196218在课题申请时仅有Ng等报道与汉人T2DM相关[1]。有必要在汉人GDM中开展调查研究。该研究选取2009年6月—2012年6月在该院产科住院的孕产妇为研究对象，现将结果总结如下。
1对象与方法
1.1研究对象
研究对象为2009年6月—2012年6月在该院产科住院的孕产妇。于孕24~28周行75 g口服葡萄糖耐量试验（OGTT）,依据美国糖尿病学会2004年颁布的GDM标准进行诊断。研究对象均为同期住院分娩孕产妇,排除糖耐量异常以及I型糖尿病，胰腺炎及胰腺手术者，其中病例组144例，年龄22~45岁，平均（31.88±4.21）岁，新生儿体重1740~4900 g, 平均体重(3366.88±529.36) g;对照组为145例，年龄18~41岁，平均（28.78±4.23）岁，新生儿体重1050~4750 g，平均体重（3265.07±510.92 ）g，两组患者的一般资料如年龄、新生儿体重等差异不明显，无统计学意义（P>0.05）。该研究获医院伦理学委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。
1.2研究方法
收集病例组和对照组的静脉血，用酚氯仿法提取全血基因组DNA，采用美国sequenom公司MassARRAY时间飞行质谱技术，先通过PCR扩增，SAP酶处理，延伸引物单碱基，树脂除盐纯化。芯片点样，质谱仪检测等实验步骤，最终使用Typer.4软件分析实验数据，获得分型结果。标本准确率为99.66%。引物序列如下。见表1。
1.3统计方法
统计分析采用SAS8.1版软件完成,计量资料（x±s）表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，用[n(%)]表示。非正态分布资料经对数转换后进行分析，计数资料用率表示。病例组和对照组等位基因频率和基因型分布比较采用χ2检验。等位基因患糖尿病的风险用比数比(odds ratios,OR)及95%可信区间（confidence interval,CI）表示。所有统计学均为双侧概率，P<0.05表示有统计学意义。Hardy-Weinberg平衡检验采用在线软件(http://ihg2.helmhotz-muenchen.de/cgi-bin/hw/hwal.pl)进行分析。
2结果
2.1研究对象的临床特点
2.1.1产妇年龄比较病例组144例,最小年龄22岁，最大年龄45岁,平均年龄（31.88±4.21）岁;对照组145例，最小年龄18岁，最大年龄41岁，平均年龄（28.78±4.23）岁；两组年龄差异有统计学意义（t=6.248，P=0.0001）。
2.1.2新生儿体重比较病例组141例，最大体重4900 g，最小体重1740 g，平均体重（3366.88±529.36）g；对照组144例，最大体重4750 g，最小体重1050 g，平均体重（3265.07±510.92）g；两组婴儿体重差异无统计学意义（t=1.652，P=0.100）。
2．1.3 两组间不同产式比较病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义（χ2=10.230，P=0.001），见表2。
2.2 Hardy-Weinberg平衡检验
经分析rs11196218的基因型在病例组和对照组的分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。
2.3两组间位点差异情况比较
rs11196218位点基因型频率和等位基因频率比较，见表3、4。
2.4 与国内报道结果的比较
见表5。
3 结语
rs11196218基因型和等位基因分布频率在GDM组和对照组无统计学显著的差别，表明未发现rs11196218与中国汉人GDM发病相关联。我们与张春[4]等报道的rs11196218的基因型频率和等位基因频率不相同。高龄和双胎妊娠是中国汉人妇女GDM的发病因素，合并GDM患者剖腹产率升高。
4 讨论
上述研究中除回园敕等和该研究的病例组为GDM外均为T2DM。Syeda Sadia Najam [3],等研究发现rs11196218的单核苷酸多态性与T2DM显著性相关联，其他研究均未发现该SNPs与T2DM或GDM有显著的相关性。由以上结果可知，对照组和病例组采用GDM和非GDM方式相比较，对照组剖腹产69（47.9%），非剖腹产75（52.1%），病例组剖腹产94（66.7%），非剖腹产47（33.3%），病例组剖腹产比率高于对照组，差异具有统计学意义。且两组间rs11196218位点基因的基因频率AA、GG、GA，对照组分别为5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例组分别为9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差异不明显，无统计学意义。而两组间等位基因A及G分布频率分别为对照组31.5（21.9%）、112.5(78.1)，病例组38(26.4%)、106(73.6%)，差异无显著统计学意义。以上结果均与花巍，窦昊颖，黄海超，等[7]在关于细胞周期素依赖性激酶5调节亚单位相关蛋白1类似物1基因多态性与2型糖尿病相关性的研究进展中的相关数据相一致，具有临床意义。且国内外已有的研究表明T2DM与GDM有着相似的发病机理。
与其他学者报道的差异如何解释?有人从该SNPs对研究的所有人群(包括病例组和对照组)某些影响糖代谢的生理特征如早相胰岛素分泌量进行定量研究。巳知GDM和T2DM一样是受多基因遗传影响的[7-9],假定G纯合子可使早相胰岛素分泌量产生一定量减少,但由于其对疾病发生贡献量很小，且影响疾病的其他基因均正常或同时携带有抑制糖尿病的遗传基因，各种基因相互作用，从整体水平上不会发生GDM[10]。也就会出现有国人报道对致糖尿病的某一生理特征有影响，该研究发现在整体水平上等位基因在两组间分布无显著差别的情况。由于条件限制该研究标本量小，也应扩大标本量来得出更可靠结论。
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[10]Weijing Gong，Di Xiao，Guangfeng Ming,et al.Type 2 diabetes mellitus-related genetic polymorphisms in microRNAs and microRNA target sites[J].Journal of Diabetes(IF 2.939), 2014,6 (4).
（收稿日期：2014-09-11）
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