罗文英 吴显劲 罗虹烈 林 湛
东医学院附属医院检验科，广东湛江 524001
[摘要] 目的 了解2012年1月—2013年12月本院念珠菌感染状况和药敏情况。方法 临床标本经接种培养，开放性部位标本若培养出以念珠菌为优势菌株和无菌部位标本培养出念珠菌均进一步进行纯培养及药敏试验。结果 880例念珠菌以白色念珠菌为主要致病菌，其次为光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌；主要来源于老年人群，不同年龄人群念珠菌分布具有明显差异(P<0.01)；男性多于女性；以痰标本最多，尿液其次，胃液最少，不同标本来源分布具有明显差异(P<0.01)；念珠菌感染主要来自于心脑血管、肺部疾病患者，不同临床诊断类型的念珠菌感染具有明显差异(P<0.01)；不同念珠菌对氟康唑、伏立康唑的敏感性具有统计学差异(P<0.05)，以光滑念珠菌、热带念珠菌对氟康唑、伏立康唑耐药率最高。结论 白色念珠菌为本院念珠菌感染最为常见菌株，光滑念珠菌次之，在治疗心脑血管患者、老年患者，要警惕发生念珠菌等二重感染，一旦发生，要根据念珠菌药敏试验合理用药。
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关键词 ] 念珠菌；药敏试验；耐药
[中图分类号] R378 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）07（a）-0046-04
念珠菌是人类最常见的真菌病原体和第四大医院血流感染的病原体[1]，它从深部感染到表浅感染，从而造成广泛的感染[2]。而临床对念珠菌感染的经验性用药常造成耐药念珠菌的增加，致病真菌的种类和分布也不断变化[3]。可见对医院念珠菌感染的临床分析尤其是念珠菌对抗真菌药物的药敏试验分析很有必要。为了解本院念珠菌感染状况及药敏情况，本研究对2012年1月—2013年12月期间本院所有住院患者标本中分离得到880株念株菌进行归类、总结、药敏分析，以了解本院念珠菌感染的特点。
1 材料与方法
1.1 标本来源
2012年1月—2013年12月我院住院患者送检的痰、尿、粪便、分泌物、密闭腔液、导管尖、胃液、血等标本中检出的念珠菌880株，12年275株，13年605株，且均无重复计数。
1.2 质控菌株
白假丝酵母菌ATCC 14503。
1.3 仪器与试剂
沙保弱溴甲酚绿真菌培养基平板(珠海市银科医学工程有限公司)、酵母菌鉴定卡(bioMerieux 、美国)、Vitek自动化细菌鉴定及药敏分析系统(梅里埃、法国生物)、念珠菌显色平板及其它培养基和试剂均购自广州市迪景微生物科技有限公司。药敏纸片有：氟康唑、伏立康唑、氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑，均购于英国Oxoid公司。结果按2003年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)酵母菌纸片扩散法标准进行判断。
1.4 方法
将标本按常规方法培养分离得到的念珠菌转种到念珠菌显色培养基上进行分类鉴定，并挑取纯菌落于生理盐水中制成相当于2McF浓度的混悬液采用纸片扩散(K-B) 法进行药敏试验，35℃环境中24 h判断结果，严格按照2003年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)酵母菌纸片扩散法标准进行判断
1.5 统计方法
采用spss 13.0统计软件进行统计分析。计量数据用均数±标准差表示，采用t检验，计数资料用n(%)表示，采用多个独立样本非参数检验，检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 880株念珠菌分布及构成比
念珠菌分布见表1，以白色念珠菌498例最多，构成比为56.59%；光滑念珠菌198例，构成比为22.5%；热带念珠菌131例，构成比为14.89%；近平滑念珠菌53例，构成比为6.02%。念珠菌构成比间具有明显差异(P<0.01)。
2.2 880株念珠菌的人群分布
880株念珠菌在不同人群中分布特点见图1，以男性老年人群325例最多，占总人群构成比为 36.93%；女性老年人群181例位居第二，占总人群20.57%。然后以中年人群居多，男、女分别为107(12.16%)、82(9.32%)例；以儿童期人群最少，男、女分别为4(0.45%)、1(0.11%)例。880分离念珠菌在不同人群中分布采用多个独立样本非参数检验，χ2=55.221，P=0.00，具有明显差异。
2.3 880株念珠菌的性别分布
880株念珠菌在不同性别人群中分布见图2，男性542例多于女性338例。经多个独立样本非参数检验统计分析，880株念珠菌在男、女性别间分布没有差异(χ2=1.021，P=0.312)。
2.4 880例念珠菌的标本类型分布
标本类型分布见图3，以痰标本369例最多，构成比为41.93%；尿液286例其次，构成比为32.5%；胃液7例最少，构成比为0.8%。880例念珠菌的标本类型分布经多个独立样本非参数检验具有明显统计学差异(χ2=203.805，P=0.000)。
2.5 880例念珠菌的临床类型分布
见图4，880例念珠菌的临床诊断类型具有明显差异(χ2=32.177，P=0.00)，以其他类型疾病312例居多，构成比为35.45%，其次分别以心脑血管疾病240(27.27%)、肺部疾病133(15.11%)、骨折外伤疾病105( 11.93% )例居多。
2.6 880例念珠菌对抗真菌药物的敏感程度分析
880例念珠菌对氟康唑、伏立康唑、氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑的敏感程度分析分别见表1、2、3、4、5、6，对氟康唑、伏立康唑、氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑的耐药率分别为15.17%、13.52%、3.49%、2.53%、2.22%。四种念珠菌对氟康唑、伏立康唑的药敏敏感程度具有明显统计学差异(P<0.01)，对氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑的药敏敏感程度没有明显差异(P>0.05)
3 讨论
念珠菌属是引发人类侵袭性真菌感染的最常见病原菌，该类致病菌所致感染类型广泛，从没有生命危险的皮肤粘膜异常到能侵袭到身体中任意器官的侵袭性念珠菌病。因常常侵犯血液、骨骼系统和内脏器官，其危害性极大，患者预后差，病死率高[4-5]。我院细菌室承担了全院各科室临床标本的真菌检测任务，在检测过程中，先对各类标本进行培养，痰、尿液、大便、胃液等开放性标本培养出念珠菌为优势菌株才进行纯培养及药敏试验，其他密闭腔标本若有念珠菌培养出，在排除了人为污染来源后，均进行纯培养及药敏试验。在本研究中，分离鉴定出绝大部分的真菌为念珠菌，而念珠菌中又以白色念珠菌最为常见，光滑念珠菌次之，而克柔念珠菌在本院2012—2013年度仅有十几例，在这里没有列出，念珠菌构成比间具有明显差异(P<0.01)，这与文献[6]报道的有所不同，可见不同医院致病真菌的种类在发生变化。临床医生应根据真菌药敏试验进行用药，以免造成真菌耐药。
880例分离念珠菌在不同人群中分布具有明显差异(P<0.05)，以中老年患者最常见，与文献[7]报道相符。男性542例高出女性338例，但没有统计学差异(P>0.05)，这可能与男性的生活习惯比女性差，容易患慢性疾病有关。880例念珠菌的临床诊断类型分布具有明显差异(P<0.01)，以其他类型疾病312(35.45%)例居多，其次分别以心脑血管疾病240(27.27%)、肺部疾病133(15.11%)、骨折外伤疾病105(11.93%)例居多，可能与这类患者免疫功能低下，心脑血管患者需要长期卧床及长期应用抗生素，易造成菌群失调，真菌容易定植有关。可见中老年及这类临床诊断患者要警惕易患侵袭性真菌感染的风险，在治疗过程中要注意提升患者的免疫能力及抗生素的合理应用等因素。
880例真菌感染以痰标本最多，尿液次之，标本类型分布具有明显统计学差异(P<0.01)。可见在本院侵袭性念珠菌感染中，念珠菌可能容易侵袭呼吸道、泌尿系统这类器官，另一方面也有可能由于患呼吸道、泌尿系统疾病患者居多，或由于抗生素不合理应用、抵抗能力低下有关，具体原因还有待于进一步进行研究。
880例念珠菌的药敏检测结果见表2~6，念珠菌对氟康唑、伏立康唑、氟胞嘧啶、两性霉素B、伊曲康唑的耐药率分别为15.17%、13.52%、3.49%、2.53%、2.22%。不同念珠菌对氟康唑、伏立康唑的敏感性具有统计学差异(P<0.05)，以光滑念珠菌、热带念珠菌对氟康唑、伏立康唑耐药率最高，因此，对本院光滑念珠菌、热带念珠菌治疗应不提倡使用这两类药物治疗；另外临床在治疗念珠菌感染时应考虑不同念珠菌对抗真菌药物的耐药性。本院研究资料还表明两性霉素B、伊曲康唑对念珠菌敏感性较好，在临床应用中若排除其副作用可以优先使用。
总之，本研究结果提示，中老年患者患有心脑血管疾病或免疫功能低下者，在住院治疗过程中，要注意合理用药，及时采集有效的感染标本如痰(或尿)标本进行涂片和真菌培养检查，做到早发现，早治疗。开展真菌耐药监测不仅可指导临床合理使用抗真菌药物，也为制定控制真菌耐药性产生和传播的措施提供科学依据，同时还为研发新型抗真菌药物提供参考。另外若对念珠菌的耐药机制进行深入研究，将为避免念珠菌耐药性的产生和研制新的抗真菌药提供理论依据。
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参考文献]
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[7] 李政,高玲,王玉春,等.498株念珠菌菌种分布及耐药性分析[J].华夏医学, 2013,26(4):666-669.
（收稿日期：2014-04-16）