辛荣传 周益强
广西百色市第一人民医院输血科，广西百色 533000
[摘要] 目的 探讨微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体在临床上的应用价值。方法 选取我院收治的申请输血治疗患者2810例。分别采用微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验对其不规则抗体进行检测，并对比两者的检测结果。结果 微柱凝胶间接抗球蛋白试验的阳性例数有18例，阳性率为0.64%，明显高于试管间接抗球蛋白试验的阳性0.50%（14/2810），其差异具有统计学意义(P＜0.05)。两种试验方法均呈阳性的标本有14例，试管间接抗球蛋白试验漏检有4例。结论 微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体，具有较好的敏感性、易于操作、试验重复性好以及结果判断简易等优点，对满足临床用血的需求和保证其安全性有重大的价值，值得进一步推广应用。
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关键词 ] 微柱凝胶间接抗球蛋白试验；不规则抗体；应用价值
[中图分类号] R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）02（c）-0022-02
The application of micro column gel indirect antiglobulin test on the detection of irregular antibody
XIN Rongchuan ZHOU Yiqiang
Department of Blood Transfusion，the First People’s Hospital of Baise City, Guangxi 533000, China
[Abstract] Objective To explore the value of the application of micro column gel indirect antiglobulin test on the detection of irregular antibody. Methods 2810 patients were selected in our hospital. The irregular antibodies of them were detected by the micro column gel indirect anti-globulin test and tube indirect antiglobulin test, and the results of both methods were compared. Results 18 positive cases (0.64%) appeared in the micro column gel indirect anti-globulin test, significantly higher than that of the tube indirect Coombs test (0.50%, 14/2810 ), the difference was statistically significant (P<0.05 ). There were 14 positive specimens in both methods, 4 cases missing the tube indirect antiglobulin test. Conclusion Micro column gel indirect antiglobulin test has good sensitivity, easy operation, good repeatability and test results on detection of irregular antibodies, it has significant to meet the use of clinical blood and guarantee its safety, it is worth popularizing.
[Key words] Micro column gel indirect antiglobulin test; Irregular antibody; Application value
在现代临床上对疾病的治疗上，输血技术的应用在临床急救、挽救患者的生命上，起到了极其重要的作用，对各种外伤等急性出血性疾病的临床救治，均离不开输血治疗的措施。ABO血型系统的发现，给输血技术的应用提供了基础条件[1]。但是随着现代医学技术水平的不断发展，临床对输血治疗的要求已经提升到了一个新的层次，以往ABO血型系统已经难以满足输血安全的需要。随后陆续发现了Rh等各种血型系统，这些均是人体红细胞上的抗原体统[2]。为了保证输血治疗的安全，患者接受输血治疗之前，必须接受交叉配血试验以及不规则抗体筛选试验。不规则抗体是人体血清中除了抗-A和抗-B之外的各种血型抗体。这些不规则抗体同样会引起输血反应，轻者出现发热、寒战等，重者可以出现严重的溶血反应而危及患者的生命[3]。因此，在输血之前对受血者的血清中的有临床意义的不规则抗体进行筛查，对临床输血的安全具有重要的意义。笔者对我院自2010年10月—2012年10月期间申请输血治疗的患者，输血前进行不规则抗体筛选，并比较微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验的差异，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取自2010年10月—2012年10月期间，我院收治的患者中，申请输血治疗的患者，共计2810例。其中男性患者有1774例，女性患者有1036例。患者年龄介于10个月~85岁之间，平均年龄为（37.18±12.79）岁。
1.2 研究方法
抽取以上患者的静脉血，分别采用微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验进行检测。具体方法如下。
1.2.1 标本的制备 所有患者于接受输血治疗前的3 d内，于其肘静脉处抽取静脉血3 mL后，马上送至输血科检测。对所采集的标本采用EDTA抗凝剂抗凝，首先采用医用离心机以每分钟3000转离心3 min，通过玻璃棒对血浆层进行轻轻的搅拌，搅碎其中的纤维蛋白凝块，再以每分钟3000转离心3 min，保证血浆中没有出现纤维蛋白凝块。
1.2.2 仪器和试剂 所采用的仪器和试剂有：微柱凝胶检测卡、抗人球蛋白（IgG）血型诊断试剂卡，其中包括有广谱抗人球蛋白血清以及凝胶。微柱凝胶检测卡中还有六个孔，为了保证其内部凝胶界面的整齐性，防止有假阳性结果的出现，在进行试验前，要应用专用卡式离心机进行离心处理。同时所用到的仪器还有微孔板孵育器、抗体筛选细胞等。
1.2.3 微柱凝胶间接抗球蛋白试验 在微柱凝胶检测卡上做好标记后，吸取1%的抗体筛选细胞悬浮液50 μL于相应的凝胶管内的上段，同样吸取25 μL标本血浆于相应凝胶管的上段，随后采用微孔板孵育器进行15 min的孵育，完成后，将其取出，用专用卡式离心机进行离心处理。完成离心后，观察微柱管内的变化以得到试验结果，如果微柱管内的红细胞均匀地沉淀在其底部，则试验结果为阴性，如果微柱管内的红细胞悬浮在凝胶的中间或者在其表面，则试验结果为阳性。以上所有的操作均按说明书中的说明进行操作。
1.2.4 试管间接抗球蛋白试验 两滴标本中的血浆和一滴5%的筛检红细胞进行混合，在37℃的情况下，孵育1 h，完成后，洗涤三次红细胞，最后加进一滴广谱抗人球蛋白试剂，以每分钟2000转的速度进行离心处理，15 s后，采用肉眼和显微镜进行观察，得出试验结果。
1.2.5 抗体的筛选和鉴定 采用微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验两种方法对抗体进行筛选，筛选结果阳性的标本采用红细胞标准细胞对其进行鉴定。采用微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验进行平行对照试验。
1.3 统计学分析
对所收集的资料采用统计学软件spss 17.0统计软件数据包进行分析，计数资料采用χ2检验进行验证，P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2结果
2.1 两种试验方法的抗体筛选结果
采用两种试验方法对2810例标本的不规则抗体进行筛查中，微柱凝胶间接抗球蛋白试验的阳性例数有18例，阳性率为0.64%，明显高于试管间接抗球蛋白试验的阳性0.50%（14/2810）,其差异具有统计学意义(P＜0.05)。两种试验方法均呈阳性的标本有14例，试管间接抗球蛋白试验漏检有4例，漏检率为22.22%，见表1。
2.2抗体的特异性鉴定
对18例抗体筛选阳性的标本，采用红细胞标准细胞进行抗体的特异性鉴定。结果发现，经过微柱凝胶间接抗球蛋白试验，抗体筛选呈阳性的标本中，有3例抗-D，有8例抗-E，有2例抗-C，有3例抗-c，有1例抗-Ec，有1例抗-M，有1例抗-Lea；而试管间接抗球蛋白试验中，漏检的有4例，见表2。
3 讨论
随着输血治疗在临床上的广泛应用，输血的安全性的问题成为了临床医务工作者和患者高度关注的问题。以往的ABO血型系统已经难以满足临床用血安全的需要。ABO配型成功的患者，在输血过程中，仍然可以发生抗原抗体反应，轻者会导致输血治疗的中断，重者患者可以因为严重的溶血反应而危及生命。人类血型系统存在不规则抗体，这些抗体有些能够引起新生儿溶血病或者是溶血反应等不良后果。因此，对输血治疗前的抗体筛选是保证临床用血安全的关键。人体血清不规则抗体的检出率较低，相关文献报道显示，其检出率介于0.2%~2%之间[4]，某些医院对此不够重视，甚至没有开展不规则抗体筛选，给临床用血安全留下了隐患。
在本组研究中，筛选出Rh(D)抗体3例，Rh（D）抗原是Rh血型系统中的具有最强的抗原性，大多数Rh（D）阴性的患者在接触了Rh（D）阳性的红细胞后，均会产生抗体。由于临床上对Rh（D）的重视，将其列为常规检测项目，并进行了针对性的预防措施，因此，抗D的发生率有了较为明显的下降趋势[5]。而抗E的发生率却有了明显的上升[6]，本组研究筛选出8例。
微柱凝胶间接抗球蛋白试验和试管间接抗球蛋白试验两种方法的对比上，前者是通过凝集细胞以及单个细胞在凝胶系统中的不同效应，经过离心处理后，可以将两种细胞分隔开来，从而得出不同的结果[7]。本方法具有良好的重复性、易于操作且结果判断简易等优势，同时本法敏感性高，避免漏检的发生，而试管间接抗球蛋白试验的操作较为繁锁，敏感性较低，导致其临床应用受到局限。通过微柱凝胶间接抗球蛋白试验筛选抗体阴性后，再行交叉配血，能够明显提高配血的成功率，既保证了临床用血的安全，又满足了临床急救用血的需要。
综上所述，微柱凝胶间接抗球蛋白试验检测不规则抗体，具有较好的敏感性、易于操作、试验重复性好以及结果判断简易等优点，对满足临床用血的需求和保证其安全性有重大的价值，值得进一步推广应用。
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参考文献]
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（收稿日期：2013-11-15）