叶立新1 甘文彬1 潘天祥2
1.东莞市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心，广东东莞 523002；2.广东省第二中医院信息科，广东广州 510095
[摘要] 目的 结合户籍资料了解东莞地区新生儿人群中地中海贫血的发生率，探讨开展新生儿地中海贫血筛查的必要性。方法 选择在该院出生新生儿，共14 910例，对其采取血红蛋白电泳法对地中海贫血进行筛查，以基因检测结果作为标准对电泳法筛查准确性进行评价。结果 经血红蛋白电泳法共筛查出α-地贫阳性率为4.55%，β-地贫阳性率为1.72%。与基因检测结果的符合率分别为73.77%和80.65%。采用血红蛋白电泳检测和基因检测在确诊率比较上差异无统计学意义（P>0.05）。结论 血红蛋白电泳技术电泳结果区带清晰，扫描定量结果准确，在新生儿地贫筛查中发挥了重要的作用，值得推广应用。
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关键词 地中海贫血；新生儿；血红蛋白电泳；筛查
[中图分类号] R722.18 [文献标识码] A [文章编号] 1674-074２（２０１4）05（c）－０140-02
[作者简介] 叶立新（1980-），男，广东东莞人，本科，主管技师，研究方向：先天性遗传代谢病的实验诊断。
临床上地中海贫血（简称“地贫”）又被称作是“海洋性贫血”，是一种常染色体隐性遗传性疾病，会严重影响人类健康，可引起致死和（或）致残的慢性溶血性疾病。其会对珠蛋白链合成进行营销，进而导致一些珠蛋白数量不足，甚至是完全缺乏。对于新生儿而言，目前通常是采取血红蛋白电泳的方法检测脐带血中HbBart’s含量进行α-地中海贫血的筛查[1]；血红蛋白电泳的检测原理是利用血红蛋白的等电点差异，在pH8.6的缓冲溶液中所带的电荷不同，可产生不同的区带。该次研究出于了解东莞地区新生儿人群中地中海贫血的发生率的目的，对2010年10月—2012年9月于该院出生的1 4910例新生儿采取血红蛋白电泳法进行了地中海贫血筛查，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
研究对象来源于该院产科出生的新生儿，共14 910例，其中男性8 201例、女性6 709例。筛查前对新生儿家长进行相关知识的宣教和讲解，征得家长的同意并签署了知情同意书，并通过伦理委员会的批准。在新生儿出生后抽取脐带血2 mL放置在EDTA-K2抗凝管中，于40 ℃冰箱保存。
1.2 方法
1.2.1 研究方法 对以上统计的14 910例新生儿脐带血通过血红蛋白电泳实验进行HbBart’s和HbA含量测定，并对测定结果进行判断。以基因检测结果作为标准对血红蛋白电泳法筛查结果准确性进行评价，总结分析血红蛋电泳实验在地中海贫血筛查中的临床价值，统计分析东莞地区地中海贫血筛查结果。
1.2.2 检测方法 血红蛋白电泳：检测过程中所需仪器与试剂为美国helena公司Spife 2000自动电泳分析仪及其配套试剂。标本制备：取抗凝血200 μL，加入试管中，以生理盐水2500 rpm×5 min洗3次，弃上清液；取蒸馏水500 μL，加入试管中，振荡混匀，再根据各标本溶血情况进行手工溶血；往试管中加入300 μL四氯化碳溶液，振荡混匀，3 000转离心5 min。电泳制备：用点样板加已处理好的17 μL溶血标本到电泳仪内的琼脂板上，进行电泳（电泳、染色、脱色、烘干自动完成）。利用helena公司提供的扫描系统扫描各血红蛋白条带的百分比含量。
判断标准为：根据新生儿脐带血中HbBart’s的含量进行α-地中海贫血的分型：静止型（HbBart’s≤3%）、标准型（轻型，3%＜HbBart’s≤20%）、HBH病（20%＜HbBart’s≤40%）、HbBart’s水肿胎（HbBart’s＞60%）；HbA<12%怀疑为β-地中海贫血[2]。
确诊基因分析：α-地贫血经跨越断裂点聚合酶链式反应（gap-PCR）技术，经琼脂糖凝胶电泳技术进行检测；β-地贫经PCR、膜反向斑点杂交技术进行检测[3]。
1.2.3 统计分析 采用spss18.0统计软件对数据进行处理，计量资料采用均值±标准差（x±s）表示，组间比较用单因素方差分析和t检验，计数资料采用χ2检验。
2 结果
筛选结果如下表1所示。总体α-地贫阳性率为4.55%，β-地贫阳性率为1.72%，其他血红病白病阳性率为0.32%，采用血红蛋白电泳检测和基因检测在确诊率比较上差异无统计学意义（P>0.05），因此血红蛋白电泳筛查新生儿地中海贫血的准确率较高。
3 讨论
目前在临床上对于地中海贫血的筛查常用方法包括血红蛋白电泳、红细胞指数以及一管定量法脆性实验等。脐带血或者是新生儿红细胞为大细胞高色素性红细胞，对低渗作用具有较大的抵抗力，因此在筛查中采取一管定量法存在一定的限制。在实验中发现，尽管地中海贫血患儿的红细胞MCV水平较正常新生儿低，然现阶段还未存在一个明确且统一的指标，因此采取红细胞指数对地中海进行筛查的可行性较低。Weatherall[4]于1963年提出新生儿脐血血红蛋白电泳、HbBart’s定量测定技术作为筛查及诊断α地贫的敏感指标以来，我国从上世纪80年代开始应用此技术筛查及诊断α地贫。有研究表明[5]，在新生儿期，利用脐血血红蛋白电泳、HbBart’s定量测定技术筛查α地贫，其结果与基因检测结果符合率达91.8%。由于新生儿期血红蛋白的特点，新生儿轻型β地中海贫的诊断，除基因检测外， 目前国际上还没有临床实验室的诊断指标，需要到患儿1周岁左右才能确诊。据研究表明[6-7]，用血红蛋白电泳检测新生儿脐血的血红蛋白A含量，再结合红细胞脆性和父母家系分析，诊断新生儿轻型β地中海贫血较准确。因此，利用脐血血红蛋白电泳技术进行新生儿地中海贫血筛查，该技术操作简单，结果准确，敏感性与特异性良好，值得临床对其给予关注并推广使用[8]。
从检测结果看，东莞地区总体α-地贫阳性率为4.55%，β-地贫阳性率为1.72%，其他血红病白病阳性率为0.32%。虽然稍低于欧阳碧微、温晓玲等[9]在广州花都区的筛查结果，仍高于全国平均水平（α 地贫2.95%，β -地贫0.67%），分析原因，可能与以下因素有关：①东莞地处珠三角地区，外来人口多，人员构成复杂。②目前，随着人民经济、文化水平的提高，健康意识日益增强，大多数孕妇在孕期都常规产检。③在该院出生的新生儿，其父母大多在该院进行婚检、产检，而该院近年来已常规开展婚前、产前的地贫筛查，对于夫妻双方均为地贫携带者，开展健康教育，在其怀孕后对胎儿进行产前诊断；对生育过中、重型地贫患儿的夫妻，进行产前诊断。对发现患有重型地贫的胎儿，及时终止妊娠。④该筛查是在东莞市妇幼保健院出生的所有新生儿中进行，不是在因贫血等各种原因就诊的患者中进行检查，筛查人群基数大，相对地使得检出率下降[10]。
该研究中采取血红蛋白电泳法对东莞地区的新生儿地中海贫血进行了筛查，并以基因检测结果作为标准对筛查结果进行了评价，结果发现，经血红蛋白电泳法筛查，结果发现本地区新生儿α-地贫阳性率为4.55%，β-地贫阳性率为1.72%，其他血红病白病阳性率为0.32%，血红蛋白电泳筛查α-地贫结果与基因检测结果符合率为73.77%，血红蛋白筛查β-地贫结果与基因检测结果符合率为80.65%，这一结果与相关文献报道结果接近[11]，证实了血红蛋白电泳法在地贫筛查中的优势，准确性较高，敏感性与特异性理想。
综上所述，东莞地区新生儿地贫阳性率较高，特别是α-地贫，因此定期开展地贫筛查的临床意义重大。该研究中发现，血红蛋白电泳法在地贫筛查中存在显著优势，其该技术操作简单，结果准确，敏感性与特异性良好，值得临床对其给予关注并推广使用。
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参考文献
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[9] 欧阳碧微，温晓玲.广州花都区1983例新生儿脐血α-地中海贫血筛查分析[J].国际医药卫生导报，2010，16（24）：3059-3061.
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（收稿日期：2014-02-25）